[发明专利]食蟹猴急性肝功能衰竭模型的构建方法

说明书

本发明公开一种食蟹猴急性肝功能衰竭模型的构建方法，其包括以下步骤：选取健康的饲养食蟹猴；麻醉食蟹猴之后，显露腹部内的右肾门，理顺出右肾静脉、右肾动脉和右侧输尿管；显露第一肝门，理顺出门静脉、肝动脉和胆总管；结扎所述右肾动脉和右肾静脉的近右肾门端，自右肾静脉的远右肾门端向心插入流转管至下腔静脉内并固定；结扎并离断所述胆总管，结扎所述门静脉的近肝脏端，门静脉的远肝脏端自门静脉的近心端向远心端插入所述流转管的另一端并固定；使所述流转管内充盈血液之后，闭合所述腹部继续饲养。本发明操作简便，成功率高，造模效果理想，所建立的急性肝功能衰竭模型能够很好地用于人工肝支持系统的安全性和有效性的临床前评估。

技术领域

本发明涉及一种动物模型的构建方法，尤其涉及一种食蟹猴急性肝功能衰竭模型的构建方法。

背景技术

急性肝功能衰竭(ALF)是指无基础肝病史的患者2周以内出现以Ⅱ度以上肝性脑病为特征的肝衰竭临床表现，起病急，病程短，预后差，文献报道病死率高达80％。目前，原位肝移植是临床治疗急性肝功能衰竭的有效手段，但供体有限、费用昂贵等因素，极大地限制了肝移植手术的推广和普及。近年来，体外人工肝支持系统(ALSS)的出现为挽救肝功能衰竭患者的生命带来了希望。

ALSS可分为非生物人工肝和生物人工肝。目前研究较多且最具前景的是生物人工肝。生物人工肝是利用培养的生物活性成分(肝细胞)置于体外生物反应器中，患者血液或血浆流过生物反应器，通过半透膜或直接接触与反应器内培养的肝细胞进行物质交换，为肝功能衰竭患者提供肝脏支持功能。各种类型的生物人工肝研究都离不开体外肝支持的动物实验，合适的动物模型是其性能评价和进一步临床应用的重要条件。

目前，建立急性肝衰竭动物模型的方法主要包括药物法和手术法。药物法制备的ALF动物模型优点是操作简单方便，无需麻醉，但是，由于动物不同个体之间以及同一动物在不同条件下对药物的耐受能力和代谢情况差异较大，故所制备的模型稳定性稍差，主要表现在生化指标的改变，病理组织学的改变以及死亡率和生存时间上均变化较大。手术制备ALF动物模型仍然是目前较多的造模方法，尤其是大动物的ALF模型。目前，外科手术模型主要包括肝切除模型和急性肝缺血模型(肝血流阻断模型)，前者包括全肝切除模型和部分肝切除模型，全不可逆性、治疗窗窄、手术操作要求高、病理变化与临床不相符合等缺点；部分肝切除尚未有统一的标准。因此，急性肝缺血模型成为外科模型中最多见的模型。急性肝缺血模型制备最常用的方法是门腔静脉吻合术(PCA)加肝动脉结扎术(HAL)。该方法多数情况下需分期手术阻断入肝血流，操作繁琐且难度相对较大，同时动物生存时间较短，不能完全满足人工肝等实验的治疗时间窗。

因此，有必要建立一种操作简单，重复性强和稳定性好的急性肝功能衰竭模型制备的方法。

食蟹猴属于非人灵长类动物，在亲缘关系上和人最接近，在组织结构、免疫、生理和生化和代谢等方面和人类高度相似，是极其珍贵的实验动物，其应用价值远远超过其他种属的实验动物，是急性肝功能衰竭和生物人工肝向临床过渡研究中最理想的动物模型。

发明内容

本发明的目的是为克服现有技术的不足，提供一种操作简单，重复性强和稳定性好的食蟹猴急性肝功能衰竭模型的构建方法。

为达到以上技术目的，本发明采用的技术方案如下：

一种食蟹猴急性肝功能衰竭模型的构建方法，其包括以下步骤：

选取健康的饲养食蟹猴；

麻醉食蟹猴之后，显露腹部内的右肾门，理顺出右肾静脉、右肾动脉和右侧输尿管；显露第一肝门，理顺出门静脉、肝动脉和胆总管；

结扎所述右肾动脉和右肾静脉的近右肾门端，自右肾静脉的远右肾门端向心插入流转管至下腔静脉内并固定；

结扎并离断所述胆总管，结扎所述门静脉的近肝脏端，门静脉的远肝脏端自门静脉的近心端向远心端插入所述流转管的另一端并固定；