[发明专利]一种竹柳抗真菌活性组分的制备方法及应用

权利要求书

1.一种竹柳抗真菌活性组分的制备方法，其特征是，将竹柳皮粉末，用5至20倍无水乙醇超声提取1～5次，每次30-120min，得提取液；提取液经水沉及石油醚浸提，减压硅胶柱梯度洗脱，收集体积比为1:1的石油醚-乙酸乙酯混合液洗脱段的洗脱液，即得竹柳抗真菌活性组分。

2.如权利要求1所述的竹柳抗真菌活性组分的制备方法，其特征是，具体步骤如下：

A)提取：以竹柳皮为原料，以无水乙醇作为溶剂，超声波提取，提取方法为原料粒度10～40目，料液比1:5～1:20，超声频率9～18KHz，超声温度20～50℃，超声时间30～120min，超声次数1～5次；

B)水沉及石油醚浸提：步骤A)的提取液减压浓缩至无乙醇残留，加入与原料等量的蒸馏水，于4℃条件下保存12～24h，离心，取下层沉淀，沉淀用10～20倍量石油醚于20～40℃条件下浸提12～24h，抽滤，滤液浓缩至一定体积，得浸膏；

C)减压硅胶柱层析分离：200～300目硅胶湿法装柱，径高比1:5，步骤B)所得浸膏石油醚溶解，湿法上样，以石油醚-乙酸乙酯体系为洗脱剂，梯度洗脱，收集体积比为1:1的石油醚-乙酸乙酯混合液洗脱段，HPLC检测；

D)干燥及保存：步骤C)洗脱液减压浓缩至一定体积，真空干燥，经消毒、杀菌后，得到具有抗真菌活性的竹柳石油醚提取物，即竹柳抗真菌活性组分粉末。

3.如权利要求2所述的竹柳抗真菌活性组分的制备方法，其特征是，所述步骤A)竹柳皮粉末原料粒度为24目，料液比为1：10，超声频率18KHz，超声温度30℃，超声时间60min，超声次数3次。

4.如权利要求2所述的竹柳抗真菌活性组分的制备方法，其特征是，所述步骤B)水沉时间为18h；所述的石油醚的沸点为60～90℃，石油醚浸提温度为30℃，浸提时间为18h。

5.如权利要求2所述的竹柳抗真菌活性组分的制备方法，其特征是，所述步骤C)梯度洗脱溶剂为石油醚、石油醚：乙酸乙酯＝5:5以及乙酸乙酯，每个梯度梯度洗脱至流出液为无色时，更换下一个梯度，每个梯度洗脱3个柱体积的洗脱剂。

6.含权利要求1-5任一所述的制备方法获得的竹柳抗真菌活性组分的制剂，其特征是，由竹柳抗真菌活性组分和药学上可接受的载体或稀释剂组成。

7.如权利要求6所述的含竹柳抗真菌活性组分的制剂，其特征是，所述制剂为片剂、糖衣丸、胶囊、注射剂、溶液、乳液、油膏、乳膏、气雾剂或栓剂。

8.权利要求6或7所述制剂在制备防治真菌感染所致疾病的药物中的应用。

9.如权利要求8所述的应用，其特征是，所述真菌包括霉菌、白色念珠菌、红色毛癣菌、须癣毛癣菌、犬小孢子菌。

10.如权利要求8所述的应用，其特征是，所述真菌感染所致疾病为手足癣。