[发明专利]人尿液中儿茶酚胺类物质和其甲氧基代谢物含量的检测方法

权利要求书

1.人尿液中儿茶酚胺类物质和其甲氧基代谢物含量的检测方法，其特征在于：将尿液样品经酸化预处理后进行固相萃取，然后采用高效液相色谱电化学法检测；

所述高效液相色谱电化学法的色谱柱为ACCHROM XCharge C18柱、流动相为0.2v/v%三氟乙酸水溶液、柱温为30℃、 流速为1.0 mL/min、检测电压为+0.9V。

2.根据权利要求1所述的人尿液中儿茶酚胺类物质和其甲氧基代谢物含量的检测方法，其特征在于：所述酸化预处理是指用10 mol/L的盐酸溶液将尿液样品酸化至pH1.0。

3.根据权利要求1所述的人尿液中儿茶酚胺类物质和其甲氧基代谢物含量的检测方法，其特征在于：所述固相萃取是指将预处理的尿液样品上样至萃取柱，用水淋洗后再用2%氨化甲醇洗脱。

4.根据权利要求1所述的人尿液中儿茶酚胺类物质和其甲氧基代谢物含量的检测方法，其特征在于：包括以下步骤：

步骤1，尿液样品预处理：将尿液样品用10 mol/L的盐酸溶液酸化至pH1.0，并储存在-20℃冰箱中；

步骤2，供试品溶液的制备：先将Cleanert PCX-SPE萃取小柱用甲醇和水活化后，将预处理好的尿液样品上样至萃取柱，用水淋洗后再 用2%的氨化甲醇洗脱，收集的溶液经氮气吹干后用流动相溶解，然后用尼龙NYLL滤头过滤；

步骤3，混合标准溶液的配制：取1.0 mg/mL的甲肾上腺素、肾上腺素、去甲苄肾上腺素、间甲肾上腺素对照品储备液分别配制成浓度为0.050 μg/mL、0.10 μg/mL、0.20 μg/mL、0.50 μg/mL、1.0 μg/mL、2.0 μg/mL、5.0 μg/mL、10.0 μg/mL、20.0 μg/mL和50.0 μg/mL的混合标准溶液，含内标异丙肾上腺素2.0 μg/mL，按尿液样品预处理和供试品溶液制备步骤制备一系列混合标准溶液；

步骤4，精密量取供试品溶液和混合标准溶液各20 μL，分别注入液相色谱仪，记录色谱图；

步骤5，采用异丙肾上腺素为内标物，以被测物质的峰面积与内标物峰面积比对被测物质浓度进行线性拟合，得工作曲线，根据供试品溶液得到的峰面积和拟合得到的工作曲线，计算人尿液中甲肾上腺素、肾上腺素、去甲苄肾上腺素、间甲肾上腺素的含量。