[发明专利]一种生物素标记探针联合蛋白芯片寻找小分子化学药靶点的方法在审
申请号: | 201611086740.7 | 申请日: | 2016-11-28 |
公开(公告)号: | CN108120810A | 公开(公告)日: | 2018-06-05 |
发明(设计)人: | 祝健 | 申请(专利权)人: | 宁波源溯生物科技有限公司 |
主分类号: | G01N33/15 | 分类号: | G01N33/15;G01N33/68 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 315000 浙江省宁波市*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 小分子化学药 蛋白芯片 生物素标记探针 标记探针 结合位点 生物素 靶点 计算机软件 链霉亲合素 分子化学 技术手段 细胞产生 靶蛋白 共孵育 固定的 高通 洗涤 蛋白质 蛋白 芯片 筛选 检测 分析 联合 | ||
1.一种生物素标记探针联合蛋白芯片寻找小分子化学药作用靶点的方法,其特征在于采用以下步骤:将生物素与小分子化学药进行连接,形成一种“生物素-小分子化学药”标记探针,然后将这种标记探针直接与蛋白芯片共孵育,经过BODIPY-FL链霉亲合素洗涤后,根据检测蛋白芯片上的生物素标记探针和BODIPY-FL链霉亲合素结合而确定药物与芯片上固定的已知蛋白之间特异性的结合位点,进而通过计算机软件分析这些结合位点的蛋白。
2.根据权利要求1所述一种生物素标记探针联合蛋白芯片寻找小分子化学药作用靶点的方法,其特征在于:通过共价键、配位键、氢键、静电吸附中的任意一种或任意几种的组合作用将生物素与小分子化学药进行连接;获得的产物通过分离纯化以除去游离成分,得到“生物素-小分子化学药”纳米标记探针,然后将这种探针与蛋白芯片进行孵育。
3.根据权利要求1所述一种生物素标记探针联合蛋白芯片寻找小分子化学药作用靶点的方法,其特征在于:采用氯代生物素(Biotin-Cl)或者溴代生物素(Biotin-Br)分子将生物素与小分子化学药进行连接,然后将获得的探针与蛋白芯片进行孵育,其中采用的氯代生物素(Biotin-Cl)或者溴代生物素(Biotin-Br)分子将与小分子化学药官能团偶合反应,官能团包括羟基、羧基、氨基、胫基中的一种或任意几种组合。
4.根据权利要求2-3中所述一种生物素标记探针联合蛋白芯片寻找小分子化学药作用靶点的方法,其特征在于:所述连接过程是在水相、有机相或水与有机溶剂的混合液中进行的。
5.根据权利要求1-3所述一种生物素标记探针联合蛋白芯片寻找小分子化学药作用靶点的方法,其特征在于:所述的蛋白质芯片其点样区的蛋白质是受体、抗体或特异蛋白质,尤其是指与待测药物作用机理相关的受体、抗体或特异蛋白质。
6.根据权利要求5所述的标记探针的组合,其特征在于由所述任意一种生物素为核。
7.根据权利要求1-3所述一种生物素标记探针联合蛋白芯片寻找小分子化学药作用靶点的方法,其特征在于:所述的小分子化学药,是指单一化合物。
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