[发明专利]一种富含生长因子的壳聚糖可溶性纱布的制备方法

权利要求书

1.一种富含生长因子的壳聚糖可溶性纱布的制备方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤：

S1、按照重量比例称取辅料配置血小板预处理液；

S2、制备血小板冻干缓冲液；

S3、制备预处理的富血小板血浆；

S4、配置羧甲基壳聚糖溶液；

S5、制备富含生长因子的壳聚糖可溶性纱布。

2.根据权利要求1所述的一种富含生长因子的壳聚糖可溶性纱布的制备方法，其特征在于，所述的辅料由包含以下重量份的原料组成：3.214gNaCl、0.157gKCl、0.078gCaCl₂、0.271gMgSO₄、2.604gNaHCO₃、0.714g柠檬酸、1.970g柠檬酸钠、1.230g乙酸钠、2.120g葡萄糖、17.117g海藻糖。

3.根据权利要求1所述的一种富含生长因子的壳聚糖可溶性纱布的制备方法，其特征在于，S1中所述血小板预处理液的配置方法包括：将3.214gNaCl、0.157gKCl、0.078gCaCl₂、0.271gMgSO₄、2.604gNaHCO₃、0.714g柠檬酸、1.970g柠檬酸钠、1.230g乙酸钠、2.120g葡萄糖、17.117g海藻糖均匀混合后，用超纯水溶解并定容至1L，按1ml所述血小板预处理液加入1ul可逆性血小板激活抑制剂的比例加入可逆性血小板激活抑制剂前列腺素E1，然后加入NaHCO₃来调节pH为6.6～6.8，然后用0.22um滤器过滤后备用。

4.根据权利要求1所述的一种富含生长因子的壳聚糖可溶性纱布的制备方法，其特征在于，S2中所述血小板冻干缓冲液的制备方法包括：在S1中所述血小板预处理液中加入体积分数为30％(vol/vol)的蛋白质类保护剂调节pH为6.6～6.8，然后用0.22um滤器过滤后备用。

5.根据权利要求4所述的一种富含生长因子的壳聚糖可溶性纱布的制备方法，其特征在于，所述的蛋白质类保护剂选自血浆。

6.根据权利要求1所述的一种富含生长因子的壳聚糖可溶性纱布的制备方法，其特征在于，S3中所述预处理的富血小板血浆的制备方法包括：汇集6-8人份的血小板，通过离心处理并移去上层清液得沉淀A，然后用S1中所述血小板预处理液重悬所述沉淀A，调整所述沉淀A中的血小板计数，在37℃水浴震荡4h，使血小板保持悬浮状态，将上述血小板悬液离心处理并移去上层清液得沉淀B；然后将S2中所述血小板冻干缓冲液离心处理并移去上层清液得沉淀C，将所述沉淀B和沉淀C按照等体积混合重悬血小板，即得预处理的富血小板血浆。

7.根据权利要求1所述的一种富含生长因子的壳聚糖可溶性纱布的制备方法，其特征在于，S4中所述羧甲基壳聚糖溶液的配置方法包括：将4g羧甲基壳聚糖用200ml灭菌水彻底溶解，持续搅拌12h，使其彻底溶解，然后用0.45um滤器过滤除菌，终浓度为2％(wt/vol)，并调整pH至7～8。

8.根据权利要求1所述的一种富含生长因子的壳聚糖可溶性纱布的制备方法，其特征在于，S5中所述富含生长因子的壳聚糖可溶性纱布的制备方法包括：将S3中所述预处理的富血小板血浆与S4中所述羧甲基壳聚糖按体积比为1：2搅拌混合均匀后加入培养皿中，厚度为4mm，密封保存在-80℃冰箱预冻过夜后，转移至冷冻干燥机冻干24h，然后裁剪成不同大小纱布，加入血小板激活剂溶液即可形成富含生长因子的壳聚糖可溶性纱布。

9.根据权利要求8所述的一种富含生长因子的壳聚糖可溶性纱布的制备方法，其特征在于，所述的血小板激活剂溶液为用5ml葡萄糖酸钙溶解500U凝血酶所配制的溶液。