[发明专利]关于检测五种类胡萝卜素的HPLC分析方法

说明书

建立枸杞果实中5种主要类胡萝卜素新黄质、叶黄质、玉米黄素、β‑隐黄质及β‑胡萝卜的高效液相色谱分析方法，分析测定7个不同品种枸杞果实中5种主要类胡萝卜素含量。样品经四氢呋喃提取、皂化8h后分析测定，采用YMC‑C30柱(4.6×250mm，5μm)分离，流动相A相：(0.1%三乙胺) 甲醇/水（75:25，V/V），B相：丙酮/二氯甲烷/甲醇（70:5:25）梯度洗脱，流速1mL/min，柱温25℃，在波长450nm处检测。5种类胡萝卜素的平均回收率为87.5%～91.5%，最低检出限为0.0007～ 0.0062μg/μL。本方法的准确度和精密度都很高，可用于枸杞鲜果类胡萝卜素的定量分析。

技术领域

类胡萝卜素的种类繁多，标准品昂贵，大部分研究是分析一两种类胡萝卜素，此方法可以对五中类胡萝卜素（新黄质、叶黄质、玉米黄素、β-隐黄质及β-胡萝卜）同时进行分析，比较其他方法，HPLC分析方法具有检测时间短、灵敏度高、检测值准确等特点，大大提高了检测效率和检测数据的可靠性。

背景技术

建立了5种类胡萝卜素新黄质、叶黄质、玉米黄素、β-隐黄质及β-胡萝卜的高效液相色谱分析方法，该方法灵敏度高，稳定性和重现性良好，回收率较高，可以作为类胡萝卜素分析的方法应用。

发明内容

HPLC分析条件：采用YMC-C30柱(4.6×250mm，5μm)分离，流动相A相： (0.1%三乙胺) 甲醇/水（75:25，V/V），B相：丙酮/二氯甲烷/甲醇（70:5:25，V/V/V）, 梯度洗脱程序：0min，100%A，0% B；5min，75%A，25% B；10min，50%A，50% B； 15min，15%A，85% B；35min，0%A，100% B； 45min，100%A，0%B，流速1mL/min，柱温25℃，检测波长450nm。

类胡萝卜素是存在于植物和微生物中的脂溶性色素，绝大多数类胡萝卜素呈黄色、橙色或红色。众多医学研究表明，类胡萝卜素具有高效淬灭单线态氧和清除自由基的作用，从而减少自由基对细胞遗传物质和细胞膜的损伤。流行病学研究显示类胡萝卜素在预防人类心血管疾病和防癌抗癌等保护人类健康方面起着更为重要的作用。但人体自身不能合成类胡萝卜素，水果和蔬菜是人类获得类胡萝卜素的重要来源。枸杞是药食同源的功能性特色植物资源，富含类胡萝卜素、黄酮类物质和枸杞多糖等多种生物活性物质，被广泛应用于保健食品行业。目前对于枸杞中类胡萝卜素的研究主要集中在不同产地、成熟度的红果枸杞中类胡萝卜素含量的研究，有关黄果和黑果枸杞及杂交枸杞株系中类胡萝卜素的研究鲜有报道。采用HPLC分析方法对几种杂交株系黄果及黑果枸杞鲜果中的5种主要类胡萝卜素组分及含量进行分析测定，以期了解不同品种的枸杞鲜果类胡萝卜素组成，为其深度加工和利用提供依据。