[发明专利]一种决明子药材中9种真菌毒素的检测方法

说明书

本发明涉及一种决明子药材中9种真菌毒素的检测方法，所述方法包括如下步骤：步骤1：标准品储备液的制备；步骤2：混合标准品储备液的制备；步骤3：标准工作溶液的制备；步骤4：供试品溶液的制备；步骤5：基质匹配标准溶液的制备；步骤6：测定。

技术领域

本发明涉及一种中药材中真菌种类及含量的检测方法，具体涉及一种决明子药材中9种真菌毒素的检测方法。

背景技术

真菌毒素是由真菌在适宜的环境条件下产生具有毒性的次级代谢产物，主要包括黄曲霉毒素、赭曲霉毒素A、玉米赤霉烯酮、单端孢霉烯族毒素、伏马毒素、黄绿毒素以及麦角生物碱等,这些真菌毒素可广泛污染农作物、植物及其副产品等。

常见真菌毒素的介绍如下：黄曲霉毒素，发现于1960年，其毒性为氰化钾的10倍，砒霜的68倍，具有肝肾毒性、致畸、致突变、免疫抑制等作用，已被世界卫生组织的癌症研究机构划定为一类致癌物质；伏马毒素诱发人体食道癌、肝癌、胃癌的发生；3-乙酰基脱氧雪腐镰刀菌烯醇、呕吐毒素/脱氧雪腐镰刀菌烯醇、雪腐镰刀菌烯醇都属于单端孢霉烯族毒素，其毒性是恶心、呕吐等急性毒性、慢性毒性，致癌、致畸、致突变，免疫毒性，遗传和细胞毒性，影响人类消化和神经系统，导致多种地方病的发生。总而言之，真菌毒素是一类天然产生的生物毒素，从古至今一直对人类、动物和植物产生巨大的潜在威胁。目前已发现的真菌毒素有200多种，对人类危害大的真菌毒素有十几种，它们一般同时具有毒性强和污染频率高的特点。

中药作为治疗药物、膳食补充剂、免疫调节剂广泛使用。世界卫生组织的一项调查表明，世界范围内约70～80％的人口在一级疾病治疗中使用过传统药物，其中主要是中草药。就真菌毒素残留而言，对药材的研究远不及食品深入和广泛，主要表现为涉及的品种及真菌毒素种类少，研究缺乏系统性；研究多局限于黄曲霉毒素，对其它毒性强、污染频度高的毒素，如赭曲霉毒素、伏马毒素等较少涉及；需要检测的药材品种、真菌毒素种类不明确，无法制定相应的真菌毒素限度；一旦污染后也没有简便可行的脱毒措施。

欧洲药典(EP6.2)规定药材中黄曲霉毒素B1≤2μg/kg，总量≤4μg/kg；韩国食品医药品安全厅(KFDA)2008年起实施甘草、决明子、桃仁、半夏、柏子仁、槟榔、山赛仁、远志及红花真菌毒素限量标准，规定黄曲霉毒素B1不得过10μg/kg；我国《药用植物及制剂外经贸绿色行业标准》中规定中成药及药材中黄曲霉毒素Bl≤5μg·kg-1(暂定)；《中国药典》2005年版一部增补本已收载黄曲霉毒素测定法(HPLC-FLD)，2010年版规定陈皮、僵香、胖大海、酸枣仁、桃仁五种药材需要检测黄曲霉毒素，规定黄曲霉毒素B1不得过5μg/kg，黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2总量不得过10μg/kg。

决明子为种子类药材，是国家卫生部公布的药食同源的物质之一，具有较好的降血脂、降血压、抗氧化、清肝明目和润肠通便的功效。决明子在存储过程中最容易受到黄曲霉毒素的污染，但其他真菌毒素对决明子的污染现有文献中并没有报道。在《中国药典》2015年版中也仅仅记载了黄曲霉毒素的检测，并限定每1000g决明子中含黄曲霉毒素B1，不得过5μg，黄曲霉毒素G2、黄曲霉毒素G1、黄曲霉毒素B2和黄曲霉毒素B1总量不得过10μg，现有方法仅检测了黄曲霉毒素相关的毒素，并没有检测其他真菌毒素。因此毒素的控制对于完善中药材质量标准、保证中药材安全具有重要作用。