[发明专利]一个从动物组织中快速提取RNA的方法在审
申请号: | 201611060552.7 | 申请日: | 2016-11-28 |
公开(公告)号: | CN108118049A | 公开(公告)日: | 2018-06-05 |
发明(设计)人: | 刘晓雷;袁新旺;管延斌;薛勰 | 申请(专利权)人: | 上海怡泽生物科技有限公司;苏州英泽生物医药科技有限公司 |
主分类号: | C12N15/10 | 分类号: | C12N15/10 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 201318 上海市浦东*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 细胞 快速提取 核酸提取试剂 动物组织 混匀 沉淀 悬浮 分子生物学领域 基因表达水平 低速离心 基因克隆 快速分离 裂解细胞 室温静置 试剂成本 组织匀浆 研磨 无异味 称重 可用 小块 加热 制备 冷却 无毒 检测 | ||
1.一个从动物组织中快速提取RNA的方法,其特征在于,所述的RNA提取方法主要分为两个大步骤:第一步是从组织中快速分离细胞;第二步是用核酸提取试剂从细胞中快速提取RNA。
2.根据权利要求1所述的从动物组织中快速提取RNA的方法,其特征在于,所述的动物为脊椎动物。
3.根据权利要求1所述的从动物组织中快速提取RNA的方法,其特征在于,所述的组织包括神经组织、肌肉组织、上皮组织、结缔组织。
4.根据权利要求1所述的从动物组织中快速提取RNA的方法,其特征在于,所述的从组织中快速分离细胞的步骤为:将组织切成小块,称重;按比例加入PBS,在尽量短的时间内研磨均匀,得到组织匀浆;组织匀浆低速离心,让比较大的组织残渣沉淀下来,单个的细胞仍然悬浮在上清中;取带有悬浮的细胞的上清至新的离心管,加PBS混匀,离心去上清,得到的沉淀即为分离出来的细胞。
5.根据权利要求1所述的从动物组织中快速提取RNA的方法,其特征在于,所述的核酸提取试剂配方为:
1% Triton X-100;
1U/μL鼠源RNA酶抑制剂;
10mmol/L DTT;
1mmol/L EDTA;
10mmol/L Tris-HCl,pH8.0。
6.根据权利要求1所述的从动物组织中快速提取RNA的方法,其特征在于,所述的用核酸提取试剂从细胞中快速提取RNA的步骤为:向细胞中加入核酸提取试剂,混匀;室温静置10分钟以裂解细胞;75℃加热10分钟以失活RNA酶;将样品放在冰上冷却,即为制备好的RNA。
7.根据权利要求1所述的从动物组织中快速提取RNA的方法,其特征在于,从动物组织中提取出的RNA可用于基因表达水平检测或基因克隆等工作。
8.根据权利要求1所述的从动物组织中快速提取RNA的方法,其特征在于,从动物组织中提取出的RNA可直接用于基因表达水平检测或基因克隆等操作,也可保存于-20℃或-80℃以待后续的实验使用。
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