[发明专利]一个从动物组织中快速提取RNA的方法在审

专利信息
申请号: 201611060552.7 申请日: 2016-11-28
公开(公告)号: CN108118049A 公开(公告)日: 2018-06-05
发明(设计)人: 刘晓雷;袁新旺;管延斌;薛勰 申请(专利权)人: 上海怡泽生物科技有限公司;苏州英泽生物医药科技有限公司
主分类号: C12N15/10 分类号: C12N15/10
代理公司: 暂无信息 代理人: 暂无信息
地址: 201318 上海市浦东*** 国省代码: 上海;31
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摘要:
搜索关键词: 细胞 快速提取 核酸提取试剂 动物组织 混匀 沉淀 悬浮 分子生物学领域 基因表达水平 低速离心 基因克隆 快速分离 裂解细胞 室温静置 试剂成本 组织匀浆 研磨 无异味 称重 可用 小块 加热 制备 冷却 无毒 检测
【权利要求书】:

1.一个从动物组织中快速提取RNA的方法,其特征在于,所述的RNA提取方法主要分为两个大步骤:第一步是从组织中快速分离细胞;第二步是用核酸提取试剂从细胞中快速提取RNA。

2.根据权利要求1所述的从动物组织中快速提取RNA的方法,其特征在于,所述的动物为脊椎动物。

3.根据权利要求1所述的从动物组织中快速提取RNA的方法,其特征在于,所述的组织包括神经组织、肌肉组织、上皮组织、结缔组织。

4.根据权利要求1所述的从动物组织中快速提取RNA的方法,其特征在于,所述的从组织中快速分离细胞的步骤为:将组织切成小块,称重;按比例加入PBS,在尽量短的时间内研磨均匀,得到组织匀浆;组织匀浆低速离心,让比较大的组织残渣沉淀下来,单个的细胞仍然悬浮在上清中;取带有悬浮的细胞的上清至新的离心管,加PBS混匀,离心去上清,得到的沉淀即为分离出来的细胞。

5.根据权利要求1所述的从动物组织中快速提取RNA的方法,其特征在于,所述的核酸提取试剂配方为:

1% Triton X-100;

1U/μL鼠源RNA酶抑制剂;

10mmol/L DTT;

1mmol/L EDTA;

10mmol/L Tris-HCl,pH8.0。

6.根据权利要求1所述的从动物组织中快速提取RNA的方法,其特征在于,所述的用核酸提取试剂从细胞中快速提取RNA的步骤为:向细胞中加入核酸提取试剂,混匀;室温静置10分钟以裂解细胞;75℃加热10分钟以失活RNA酶;将样品放在冰上冷却,即为制备好的RNA。

7.根据权利要求1所述的从动物组织中快速提取RNA的方法,其特征在于,从动物组织中提取出的RNA可用于基因表达水平检测或基因克隆等工作。

8.根据权利要求1所述的从动物组织中快速提取RNA的方法,其特征在于,从动物组织中提取出的RNA可直接用于基因表达水平检测或基因克隆等操作,也可保存于-20℃或-80℃以待后续的实验使用。

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