[发明专利]一种猪伪狂犬病毒、猪流行性腹泻疫苗组合物、制备方法及其应用

说明书

本发明涉及一种猪伪狂犬病毒(PRV)、猪流行性腹泻病毒(PEDV)疫苗组合物，该疫苗组合物包括2‑4头份免疫剂量的猪伪狂犬病毒灭活疫苗和弱毒活疫苗，以及1‑2头份剂量猪流行性腹泻病毒灭活疫苗。本发明还提供了所述疫苗组合物在治疗猪流行性腹泻疾病的制备方法及其应用，该疫苗组合物能有效诱发天然免疫，在治疗猪流行性腹泻疾病方面有显著效果，而且治疗成本低，程序简单。

技术领域

本发明属于动物病毒学领域，涉及一种猪伪狂犬病毒、猪流行性腹泻病毒疫苗组合物及其在治疗猪流行性腹泻的应用。

背景技术

猪流行性腹泻(Porcine Epidemic Diarrhea，PED)，是当前危害养猪业的重要肠道疾病，是由猪流行性腹泻病毒(PEDV)引起的接触性肠道传染病。病猪是主要传染源。各种年龄的猪都能感染发病，主要的临床症状为水样腹泻，或者在腹泻同时伴有有呕吐、脱水。症状的轻重随年龄的大小而有差异，年龄越小，症状越重。哺乳猪的发病率很高，一周龄内新生仔猪发生腹泻后3-4天，呈现严重脱水而死亡，死亡率可达50％，最高的死亡率达100％，少数猪恢复后生长发育不良。母猪发病率变动很大，约为15-90％，腹泻大约一周。肥育猪在同圈饲养感染后都发生腹泻，死亡率1％-3％。

猪伪狂犬病毒属于疱疹病毒，具有很强的刺激机体产生细胞免疫作用。在抗病原方面，非特异性免疫是基础，其特点是免疫效应出现快，作用范围广，对体液免疫具有非常重要的辅助作用。目前使用的疫苗佐剂即主要是刺激机体产生较强的天然免疫或细胞免疫，达到辅助疫苗的作用。

许多中药含有丰富的多糖、生物碱、苷类物质等，这些物质对非特异性免疫和特异性免疫均有促进作用，主要通过调动动物体内非特异性抗菌抗病毒积极因素如细胞吞噬、溶菌素、杀菌素(酶)等来增强免疫功能。

研究表明枸杞子多糖可明显增加小鼠外周血T淋巴细胞百分数，并对T淋巴细胞介导的免疫反应有明显的促进作用；鸡血藤煎液对正常脾细胞IL-2的产生有促进作用；党参能增强小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞的能力。

目前控制PED的措施主要是接种疫苗预防，由于流行野毒株与疫苗株存在差异，以及PEDV的分离培养困难，目前市场上没有较好的疫苗预防本病。但是对于发病猪的治疗方法很少，而且效果不好。本病应用抗生素治疗无效，一般的做法是严格隔离病猪，同时采用药物进行辅助治疗，推荐方案：高热金针+刀豆素，治疗成本很高。但是通常认为控制病情的最佳方式是扑杀呕吐且水样腹泻的猪，这是切断传染源、保护易感猪群的做法。

目前，国内开发了中药配方用于治疗PED，如申请号为CN201410791605.7的‘一种治疗猪流行性腹泻的中药组合物’，申请号为CN201210596621.1的‘一种治疗猪流行性腹泻的中药’。但这些治疗药方涉及药材较多，成本较高，而且疗效一般。

发明内容

鉴于上述不足，本发明提供一种猪伪狂犬病毒、猪流行性腹泻病毒疫苗组合物，以提高机体天然免疫为目的，达到治疗PED目的，采用的PRV和鸡血藤、枸杞、党参三味中药均具有提高机体天然免疫的作用。治疗配方简单，而且获得途径广泛，成本低廉，在治疗PED中具有极大的推广价值。

为了实现上述目的，本发明采取如下技术方案：

一种猪伪狂犬病毒、猪流行性腹泻疫苗组合物的制备方法，包括以下步骤：

步骤1，制备疫苗溶解液

取5-8g鸡血藤，6-10g枸杞，2-3g党参混合后，加入30-40mL蒸馏水蒸煮20-30分钟，上清液冷却后，用0.4μm滤膜过滤，即制成疫苗溶解液；

步骤2，混合配制疫苗组合物

取2-3mL疫苗溶解液溶解2-4头份剂量PRV灭活疫苗、2-4头份剂量PRV弱毒活疫苗、2-3头份剂量PEDV灭活疫苗，并充分混合，即制成一头份疫苗组合物。