[发明专利]SV82多肽及含有其作为有效成分的用于改善皮肤皱纹及保持皮肤弹性的化妆品组合物

说明书

技术领域

本发明涉及一种SV82多肽及含有其作为有效成分的用于改善皮肤皱纹及保持皮肤弹性的化妆品组合物。

背景技术

作为巴西流浪蜘蛛(Phoneutria nigriventer)的蜘蛛毒中的一种的PnTx2-6是由403个核苷酸组成，这些403个核苷酸是由多数的谷氨酸(glutamate)和信号肽(signal peptide)构成。已知为PnTx2-6会影响钠离子通道(sodium channel)流通，并且会诱导经过麻醉的老鼠的勃起。

已知为巴西流浪蜘蛛的蜘蛛毒为3,500～9,000Da大小的多肽且有100种以上，并且该蜘蛛毒在河豚毒素敏感型通道(TTX(tetrodotoxin)－sensitive way)中诱导乙酰胆碱(acetylcholine)和谷氨酸的分泌，并增加外皮突触体(cortical synaptosomes)内的钠离子的流入，从而妨碍钠通道的失活。由此会引起持续勃起症(priapism)现象。

诱导持续勃起症现象的巴西流浪蜘蛛的蜘蛛毒中的一种的PnTx2-6作为2010年以后全世界性的能够取代伟哥的天然蛋白质，正在持续地对其进行研究。但是目前为止，正确的PnTx2-6的细胞内作用机理还不得而知，并且涉及作为取代伟哥的天然蛋白质而使用的大量生产的研究也很少。

巴西流浪蜘蛛的PnTx2-6是由82个氨基酸组成且由10个半胱氨酸组成的约为9kDa的多肽。自从已知PnTx2-6多肽为通过钠离子通道来诱导持续勃起症的物质，本发明人欲将蜘蛛毒SV82(蜘蛛毒82(spider venom 82))多肽利用为目前为止没有适用过的美容整形及化妆品组合物。然而，能够从巴西流浪蜘蛛提取天然PnTx2-6多肽的方法目前为止还不得而知，并且提取蜘蛛毒SV82多肽的方法也不得而知。因此，必然需要一种利用基因工程技术的蜘蛛毒SV82多肽的生产。如上所述，就PnTx2-6多肽而言，由于10个半胱氨酸互相形成半胱氨酸结(cysteine knot)，因此，化学合成方法及利用酵母的细胞外分离方法及用于获得保持固有三维结构的肽的融合伴侣蛋白质的使用在大量生产方面都会受到限制。因此，为了解决利用大肠杆菌的细胞内生产及培养大肠杆菌时需要考虑的内毒素(endotoxin)问题，本发明人欲利用包涵体(inclusion bodies)来解决蜘蛛毒SV82多肽的大量生产及内毒素问题。

另外，欧洲授权专利第0374940号公开了一种“从hololena curta种蜘蛛毒中分离的多肽”，并且韩国公开专利第2013-0102698号公开了一种“金环胡蜂毒提取方法及利用其的功能性化妆品组合物”，但是没有记载关于本发明的SV82多肽及含有其作为有效成分的用于改善皮肤皱纹及保持皮肤弹性的化妆品组合物。

发明内容

要解决的技术问题

本发明是基于如上所述的要求而进行的，本发明人使来源于PnTx2-6基因的SV82基因经由大肠杆菌密码子优化，并利用所述优化的SV82基因制备重组载体，并且用该重组载体转化大肠杆菌，从而生产SV82多肽。另外，使用所述生产的SV82多肽作为有效成分制备多种化妆品(化妆水、精华液、乳液及霜)剂型后，进行皮肤测试并确认测试对象的皮肤皱纹改善及皮肤弹性保持效果，从而完成了本发明。

技术方案

为了解决上述问题，本发明提供一种由SEQ ID NO:2的氨基酸序列组成的SV82(蜘蛛毒82)多肽。

此外，本发明提供一种由大肠杆菌密码子优化的SEQ ID NO:1的碱基序列组成的SV82多肽编码基因。

此外，本发明提供一种包含所述基因的重组载体。

此外，本发明提供一种用所述重组载体转化的大肠杆菌。

此外，本发明提供一种在宿主细胞中生产SV82多肽的方法，所述方法用所述重组载体转化宿主细胞。

此外，本发明提供一种用于改善皮肤皱纹及保持皮肤弹性的化妆品组合物，所述化妆品组合物包含由SEQ ID NO:2的氨基酸序列组成的SV82多肽作为有效成分。

发明效果