[发明专利]一种金钱小榕的组织培养快速繁殖方法

权利要求书

1.一种金钱小榕的组织培养快速繁殖方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)外植体选取与消毒：

①选取生长健康无病虫害的金钱小榕的幼嫩茎作为外植体；

②去除多余的叶片，用洗涤剂洗涤去除枝条表面的污垢，再用纸巾吸干；

③在超净工作台上，先用70％酒精浸泡10-30s，再用无菌水冲洗1次，3-5min；

④再用0.1-0.3％的升汞溶液消毒10-15min，最后用无菌水洗涤3-5次，每次3-5min，得到消毒外植体；

(2)改良MS培养基的制备：

改良MS培养基的配方为：在改良MS培养基中FeSO₄的浓度为50～60mg/L，其它组分及浓度与原MS培养基配方完全一致；

(3)不定芽诱导：

将步骤(1)得到的消毒外植体，用无菌手术刀片切下侧芽，然后接种于不定芽诱导培养基中，进行诱导培养4周，得到金钱小榕不定芽；

诱导培养条件如下：温度为28±2℃，湿度为50-80％，光照时间为12小时/天，光照强度为600-8001x；

所述不定芽诱导培养基的配方为：在所述改良MS培养基的基础上添加6-BA和NAA，其中6-BA的浓度为0.5-2mg/L，NAA的浓度为0.05-0.5mg/L；

(4)继代增殖：

将步骤(3)得到的金钱小榕不定芽接入继代增殖培养基，进行继代培养4周，得到金钱小榕丛 苗；

继代增殖培养条件如下：温度为28±2℃，湿度为75-85％，光照时间为12小时/天，光照强度为600-10001x；

所述继代增殖培养基的配方为：在所述改良MS培养基的基础上添加6-BA和NAA，其中6-BA的浓度为1.5-2.5mg/L，NAA为0.05-0.5mg/L；

(5)无菌生根：

待步骤(4)获得的金钱小榕丛 苗长至1.5-2cm高时进行诱导生根，切下单株，接种于生根培养基中，进行生根培养20-30天，得到金钱小榕幼苗；

生根培养条件如下：培养温度为28±2℃，湿度为75-85％，光照时间为10-15小时/天，光照强度为600-8001x；

所述生根培养基的配方为：在所述改良MS培养基的基础上添加NAA，NAA的浓度为0.5-3mg/L；

(6)炼苗与移栽

步骤(5)中金钱小榕幼苗生长至根长0.5-1cm、苗高2-4cm后，将培养瓶瓶盖打开，室内炼苗培养5-7天；

然后洗净根部培养基，用消毒后的岩棉包裹好组培苗根部，放入直径为5cm的镂空塑料杯中，移至塑料大棚。

2.如权利要求1所述的金钱小榕的组织培养快速繁殖方法，其特征在于，在改良MS培养基中FeSO₄的浓度为55.6mg/L。

3.如权利要求1所述的金钱小榕的组织培养快速繁殖方法，其特征在于，在所述不定芽诱导培养基中6-BA的浓度为1mg/L，NAA的浓度为0.1mg/L。

4.如权利要求1所述的金钱小榕的组织培养快速繁殖方法，其特征在于，在所述继代增殖培养基中6-BA的浓度为2mg/L，NAA的浓度为0.2mg/L。

5.如权利要求1所述的金钱小榕的组织培养快速繁殖方法，其特征在于，在所述生根培养基中，NAA的浓度为1.5mg/L。