[发明专利]一种养血清脑制剂的检测方法

说明书

本发明涉及一种养血清脑制剂的检测方法，所述方法为高效液相色谱法，包括以下步骤：步骤1，供试品溶液的制备，步骤2，对照品溶液的制备，步骤3，色谱条件；步骤4，含量测定，将供试品溶液和对照品溶液注入高效液相色谱仪，得到色谱图。本发明提供的方法供试品经过固相色谱柱处理后，成分经富集、纯化后再分析，使得对应色谱方法的分析时间更短的同时，更保证了色谱峰的分离度和方法的重现性；且本发明清晰定义了指纹图谱的相对定量方式，共明确了含量测定的绝对定量指标(2个)和指纹图谱的相对定量指标(19个)的控制要求，控制指标更全面，对产品的质量属性进行了更量化的描述。

技术领域：

本发明涉及一种中药制剂的检测方法，特别涉及一种养血清脑制剂的检测方法。

背景技术：

养血清脑制剂(包括丸、颗粒等)是由当归、川芎、白芍、熟地黄、钩藤、鸡血藤、夏枯草、决明子、珍珠母、延胡索、细辛十一味中药和辅料制成的中成药，目前已经上市。养血清脑制剂具有养血平肝，活血通络的功效，可用于血虚肝亢所致的头痛、眩晕眼花、心烦易怒、失眠多梦等病症，在临床上具有显著的疗效。可以改善软脑膜微循环，增加脑血流量，缓解血管痉挛与止痛。目前，该药已成为临床上治疗CCCI(慢性脑供血不足)引起的头晕头痛失眠等症状的首选现代中药。养血清脑水提浸膏是养血清脑颗粒和养血清脑丸的制剂中间体。制备工艺为：当归、川芎、延胡索、决明子加乙醇加热回流提取，滤过，除杂，回收乙醇并浓缩，备用；白芍加乙醇加热回流提取，滤过，回收乙醇并浓缩，备用；熟地黄、钩藤、鸡血藤、夏枯草、珍珠母、细辛加水煎煮，滤过，浓缩，加乙醇静置，滤过，回收乙醇并浓缩，将所有提取物混合，即得养血清脑水提浸膏。

养血清脑制剂主要药味当归、川芎、夏枯草、白芍等均含有酚酸成分。近年来的研究表明酚酸类化合物不仅具有显著的抗氧化、抗自由基、抑制低密度脂蛋白的氧化以及预防心血管疾病的作用，而且具有抗癌、抗炎症和血小板凝聚等功能，在医药方面有广泛的用途。另一重要药味——决明子，其主要成分蒽醌类物质，如橙黄决明素、芦荟大黄素、大黄素、大黄酚等，也具有降血压、降血脂、抗动脉粥样硬化等功效。

中药产品作为一种多靶向作用制剂，其质量应综合评价。中药指纹图谱技术，作为一种综合宏观分析的可行手段，目前已成为国内外广泛接受的全面评价中药质量的方法。美国FDA在植物药制品指导原则中允许申报者提供产品的色谱指纹图谱资料，德国药用植物学会、英国草药典、印度草药典以及加拿大药用及芳香植物学会也都把指纹图谱作为质量控制标准的内容之一。

针对养血清脑颗粒，之前通过高效液相色谱(李文博等，养血清脑颗粒的高效液相色谱指纹图谱研究，分析化学研究简报，2011(3)：387～391，以下简称文献1)及气相色谱(李文博等，养血清脑颗粒中挥发性成分的GC指纹图谱研究，中草药，2011，42(7)：1321，以下简称文献2)分别进行过指纹图谱的研究。

然而，文献1存在如下缺陷：(1)分析时间过长(90分钟)，不利于实际生产中对养血清脑颗粒的质量评价和控制；(2)因监测波长所限(327nm、280nm)，所选定量成分含量较低(分别为阿魏酸、咖啡酸、迷迭香酸、黄芩苷)；方法未对含量较大的芍药苷进行定量测定(一般检测波长为230～240nm)；(3)未明确方法用于质量控制的评价方式。

文献2存在如下缺陷：①仅针对挥发性成分进行了定性分析，无定量监测成分，多可用于产品的定性鉴别。②本研究共识别了10个共有峰，除一个较大成分峰(Z-藁本内酯)外，各成分所占比例相对较少，且仅来源于当归、川芎两味药材，不能做于本品整体质量评价的代表图谱。

因此，发明人对养血清脑制剂(包括养血清脑颗粒、养血清脑丸等)建立了一种更为全面的、可进行整体评价的指纹图谱，以更好的反映养血清脑制剂的质量。

发明内容：

本发明提供了一种养血清脑制剂的检测方法，所述方法为高效液相色谱法，包括以下步骤：步骤1，供试品溶液的制备，步骤2，对照品溶液的制备，步骤3，色谱条件，步骤4，测定，将供试品溶液和对照品溶液注入高效液相色谱仪，得到色谱图。