[发明专利]细胞损伤修复蛋白在毕氏酵母中的诱导表达、纯化方法及其应用在审
| 申请号： | 201610864786.0 | 申请日： | 2016-09-30 |
| 公开（公告）号： | CN106636175A | 公开（公告）日： | 2017-05-10 |
| 发明（设计）人： | 杨晓松;刘超;蔡飞;安琪 | 申请（专利权）人： | 湖北科技学院 |
| 主分类号： | C12N15/81 | 分类号： | C12N15/81;C07K14/47;A61K38/17;A61P25/00;A61P13/12;A61P11/00;A61P21/00;C12R1/84 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 437100 湖*** | 国省代码： | 湖北;42 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 细胞 损伤 修复 蛋白 酵母 中的 诱导 表达 纯化 方法 及其 应用 | ||
【权利要求书】：
1.细胞损伤修复蛋白在毕氏酵母中的诱导表达、纯化方法，其特征在于，根据人源MG53蛋白氨基酸序列及毕氏酵母密码子偏爱性，将经过密码子优化后的编码人源rhMG53(TRIM72)的核苷酸序列与HIS(6×his)标签连接，构建入酵母表达载体pHKY01中，然后转入毕氏酵母GS115，通过阳性克隆筛选，获得rhMG53(TRIM72)高表达量菌株GSY001，表达产物通过Ni-镍亲和纯化柱层析获得纯化蛋白rhMG53(TRIM72)。
2.根据权利要求1所述的细胞损伤修复蛋白在毕氏酵母中的诱导表达、纯化方法，其特征在于，所述表达载体是pHKY01。
3.根据权利要求1所述的细胞损伤修复蛋白在毕氏酵母中的诱导表达、纯化方法，其特征在于，所采用的表达宿主菌为毕氏酵母GS115。
4.根据权利要求1所述的细胞损伤修复蛋白在毕氏酵母中的诱导表达、纯化方法，其特征在于，所筛选到的高表达宿主菌菌株编号为GSY001。
5.根据权利要求1所述的细胞损伤修复蛋白在毕氏酵母中的诱导表达、纯化方法，其特征在于，所述的蛋白在毕氏酵母中的诱导表达方法还包括诱导表达rhMG53(TRIM72)蛋白后，采用Ni-镍亲和纯化柱层析方法纯化所述蛋白。
6.权利要求1-7任一权利要求所述的细胞损伤修复蛋白在制备细胞损伤修复或细胞凋亡抑制药物中的应用。
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