[发明专利]一种人肠道病毒株及其应用有效
申请号: | 201610863628.3 | 申请日: | 2016-09-29 |
公开(公告)号: | CN106318914B | 公开(公告)日: | 2019-10-29 |
发明(设计)人: | 孙一晟;朱函坪;夏时畅;姚苹苹;徐芳;杨章女;朱智勇;卢杭景;周小龙 | 申请(专利权)人: | 浙江省疾病预防控制中心 |
主分类号: | C12N7/00 | 分类号: | C12N7/00;A61K39/125;A61P31/14;C12R1/93 |
代理公司: | 杭州天正专利事务所有限公司 33201 | 代理人: | 黄美娟;李世玉 |
地址: | 310051 浙江*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 人肠道病毒 免疫保护效果 病毒减毒株 病毒滴度 肌肉细胞 减毒株 毒株 研发 应用 疫苗 | ||
1.人肠道病毒株(Enterovirus)EV71/157-11-2,保藏于中国典型培养物保藏中心,保藏日期为2016年8月9日,保藏编号CCTCC NO:V201614,保藏地址中国,武汉,武汉大学,邮编430072。
2.一种权利要求1所述人肠道病毒株EV71/157-11-2在制备EV71病毒减毒活疫苗中的应用。
3.如权利要求2所述的应用,其特征在于所述减毒活疫苗是指将人肠道病毒株EV71/157-11-2接种沙鼠肌肉细胞,共培养获得的培养液离心后的上清液。
4.如权利要求3所述的应用,其特征在于所述减毒活疫苗制备方法为:待沙鼠肌肉细胞贴壁后弃培养液,接种人肠道病毒株EV71/157-11-2,轻轻摇动培养瓶使病毒与原代肌肉细胞接触均匀,37℃吸附2h后弃培养液,加入含3%血清的MEM培养液,37℃培养72-96h,待50%以上细胞出现细胞皱缩、变圆或脱落后,收集培养液,反复冻融3次,1000-2000×g离心20分钟,取上清液经0.22μm滤膜过滤,滤液与疫苗佐剂混合,即为减毒活疫苗。
5.如权利要求4所述的应用,其特征在于向所述滤液中加入终浓度为0.6mg/ml氢氧化铝,轻摇溶解1h,按0.005-0.01g/ml的量加入人血白蛋白,即为减毒活疫苗半成品。
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