[发明专利]一种基于针对特定基因反向互补序列和Py位点调控可变剪切的方法有效
申请号: | 201610852407.6 | 申请日: | 2016-09-26 |
公开(公告)号: | CN107868794B | 公开(公告)日: | 2020-10-09 |
发明(设计)人: | 单革;胡珊珊;王小林 | 申请(专利权)人: | 中国科学技术大学 |
主分类号: | C12N15/63 | 分类号: | C12N15/63;A61K48/00 |
代理公司: | 中科专利商标代理有限责任公司 11021 | 代理人: | 穆彬 |
地址: | 230026 安*** | 国省代码: | 安徽;34 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 基于 针对 特定 基因 反向 互补 序列 py 调控 可变 剪切 方法 | ||
1.一种用于调控靶标基因剪切的构建体,所述构建体包含Py位点和针对所述靶标基因的反向互补序列,其中所述反向互补序列是针对所述靶标基因的可变剪切外显子的上/下游内内含子,所述反向互补序列插入在所述Py位点3’端,其中所述靶标基因是P2RX5、HMGCS1、FAM96A、TAZ、PRR3、BTBD10或NFIC,与所述靶标基因对应的所述构建体的序列分别为SEQ ID NO.3、SEQ ID NO.5、SEQ ID NO.7、SEQ ID NO.9、SEQ ID NO.11、SEQ ID NO.13、SEQ ID NO.15。
2.质粒,其包含权利要求1所述的构建体。
3.一种调控靶标基因剪切的方法,所述方法包括以下步骤:
1)将权利要求1所述的构建体或权利要求2所述的质粒转染入细胞;
2)提取RNA;
3)检测靶标基因的可变剪接的变化。
4.根据权利要求3所述的方法,其中,步骤3)中使用RT-PCR的方法检测靶标基因的可变剪接的变化。
5.根据权利要求1所述的构建体或权利要求2所述的质粒用于制备药物的用途,所述药物用于治疗由于可变剪切错误引起的动物及人类疾病。
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