[发明专利]一种新的PD-1单克隆抗体

说明书

本发明提供了PD‑1的单克隆抗体，特别是PD‑1人单克隆抗体，该抗体以高亲和力特异性结合于PD‑1并且包括重链和轻链。本发明还提供了编码本发明抗体的核酸序列、克隆或表达载体、宿主细胞、用于表达或分离抗体的方法、包含本发明的抗体的免疫偶联物和治疗组合物。本发明进一步提供了PD‑1抗体治疗各种癌症的用途。

技术领域

本发明主要涉及PD-1单克隆抗体及其组合物，以及使用抗PD-1抗体对人类疾病的免疫治疗。

背景技术

越来越多的临床前和临床结果的证据表明，靶向免疫检查点正在成为最有希望治疗癌症患者的方法。程序性细胞死亡分子1(PD-1)其为与CD28具有同源性的免疫球蛋白超家族的抑制性成员，在活化的B细胞、T细胞和骨髓细胞中表达(Agata et al,supra；Okazaki et al(2002)Curr.Opin.Immunol.14:391779-82；Bennett et al.(2003)JImmunol 170:711-8)并在调节免疫系统中的激活和抑制信号中发挥重要作用(Okazaki,Taku et al.2007 International Immunology 19:813-824)。事实上，PD-1是在凋亡细胞的差异表达筛选中被发现的(Ishida et al(1992)EMBO J 11:3887-95)。

PD-1的结构为单体I型跨膜蛋白，属于Ig基因超家族(Agata et al.(1996)bitImmunol 8:765-72)，其由一个免疫球蛋白可变区样细胞外结构域和含有免疫受体酪氨酸抑制基序(ITIM)和免疫受体酪氨酸转换基序(ITSM)的细胞质结构域组成。尽管与CTLA-4的结构相似，但PD-1缺少与B7-1和B7-2结合的MYPPPY基序。PD-1有两个已知的配体，PD-L1(B7-H1、CD274)和PD-L2(B7-DC、CD273)，这两个配体是表达在细胞表面的B7家族成员(Freeman et al(2000)J Exp Med 192:1027-34；Latchman et al(2001)Nat Immunol 2:261-8；Carter et al(2002)Eur J Immunol 32:634-43)。与B7同源的PD-Ll和PD-L2结合于PD-1，但却不结合其他的CD28家族成员。

PD-1，作为免疫检查点蛋白之一，是CD28具有同源性的免疫球蛋白超家族的抑制性成员，在活化的B细胞、T细胞和骨髓细胞中表达(Agata et al,supra；Okazaki et al.(2002)Curr Opin Immunol 14:391779-82；Bennett et al.(2003)J Immunol 170:711-8)，并且在限制T细胞激活中发挥重要作用，这为肿瘤细胞逃脱免疫监视提供了重要的免疫抗病机制。PD-1的诱导T细胞无反应性或无反应的状态，从而导致在细胞内暂时无法产生最佳水平的效应细胞因子。PD-1也可以通过其抑制生存信号的能力诱导T细胞的细胞凋亡。PD-1缺陷动物形成各种自身免疫表型，包括自身免疫性心肌病和关节炎和肾炎狼疮样综合症(Nishimura et al.(1999)Immunity 11:141-51；Nishimura et al.(2001)Science291:319-22)。此外，已经发现PD-1在自身免疫性脑脊髓炎、全身性红斑狼疮、移植物抗宿主病(GVHD)、I型糖尿病和类风湿性关节炎中具有重要作用(Salama et al.(2003)J Exp Med198:71-78:Prokunina and Alarcon-Riquelme(2004)Hum MoI Genet 13:R143；Nielsenet al.(2004)Lupus 11:510)。在小鼠的B细胞肿瘤系，PD-1的ITSM被证明对于阻断BCR介导的Ca²⁺-flux和酪氨酸下游效应分子的磷酸化是必不可少的(Okazaki et al.(2001)PNAS98:13866-71)。