[发明专利]对HLA-A2呈递的WT1肽特异的T细胞受体样抗体

说明书

本发明提供与维尔姆斯瘤蛋白(WT1)特异性结合的抗原结合蛋白，包括针对WT1的人源化抗体、嵌合抗体和完全的人抗体、其抗体片段、嵌合抗原受体(CAR)、融合蛋白和缀合物。抗原结合蛋白和抗体与HLA‑A0201限制型WT1肽结合。此类抗体、其片段、融合蛋白和缀合物对于治疗WT1相关癌症是有用的，所述WT1相关癌症包括例如乳腺癌、卵巢癌、前列腺癌、慢性髓细胞白血病、多发性骨髓瘤、急性淋巴母细胞白血病(ALL)、急性髓样/骨髓性白血病(AML)和骨髓增生异常综合征(MDS)。在更具体的实施方案中，抗WT1/A抗体可以包含设计的用来改善蛋白质稳定性、抗体结合和/或表达水平的一个或多个构架区氨基酸置换。

本申请是中国专利申请201280026656.X的分案申请，原申请的申请日是2012年4月2日，发明名称是“对HLA-A2呈递的WT1肽特异的T细胞受体样抗体”。

相关申请的交叉引用

本申请要求来自2011年4月1日提交的美国临时申请号61/470,635和2011年5月31日提交的美国临时申请号61/491,392的优先权。这些临时申请在此通过引用的方式完整并入本公开中作为参考。

联邦资助研究的权利声明

本发明借助美国政府支持在美国国家健康研究所资助的基金P01CA23766和R01CA55349下做出。美国政府享有本发明中的某些权利。

序列表

本申请含有2012年3月29日创建的序列表；将处于ASCII格式的该文件命名为3314013AWO_Sequence Listing_ST25.txt。该文件在此通过引用方式完整地并入本申请中作为参考。

技术领域

本发明总体上涉及针对胞质蛋白的抗体。更具体地，本发明涉及针对维尔姆斯瘤癌基因蛋白(WT1)的抗体，特别地是识别与主要组织相容性抗原结合的WT1肽的抗体。

发明背景

维尔姆斯瘤癌基因蛋白(WT1)是针对大多数白血病和广泛类型癌症的吸引人的免疫治疗靶。WT1是胚发生期间正常情况下在中胚层组织中表达的锌指转录因子。在正常成年组织中，WT1表达限于CD34⁺造血干细胞中的低水平，但是在多个谱系的白血病和广泛类型的实体瘤中过量表达(1-2)。最近，已经报道WT1表达成为最小残留疾病的标志物。处于形态学缓解的急性髓样白血病(AML)患者中增加的转录物水平已经预示明显的临床复发(3，4)。另外，在患有造血系统恶性肿瘤和实体瘤的患者中检测到针对WT1的抗体，这表明WT1是一种高度免疫原性抗原(7)。

就绝大部分而言，临床批准的治疗性单克隆抗体(mAb)识别细胞表面蛋白的结构。然而，WT1是一种核蛋白并且因此是经典抗体疗法不可接近的。直至现在，靶向WT1的免疫疗法限于细胞方法，排他地旨在产生识别由MHC I类分子在细胞表面上呈递的肽的WT1特异性细胞毒CD8T细胞(CTL)反应。

为了诱导CTL反应，胞内蛋白通常由蛋白酶体或内体/溶酶体降解，并且所产生的肽片段与MHC I或II类分子结合。这些肽-MHC复合体展示在细胞表面，在细胞表面它们通过肽-MHC(pMHC)-T细胞受体(TCR)相互作用为T细胞识别提供靶(8，9)。用源自WT1蛋白的肽接种诱导HLA限制型细胞毒CD8T细胞，后者能够杀伤肿瘤细胞。

为了改善功效，可以采用单克隆抗体疗法靶向癌抗原。单克隆抗体(mAb)疗法已经显示通过多种机制产生强有力的抗肿瘤作用，所述机制包括补体依赖的细胞毒性(CDC)、抗体依赖的细胞毒性(ADCC)和直接细胞抑制或凋亡诱导针对过量表达靶分子的肿瘤细胞的作用。另外，mAb可以用作向肿瘤细胞特异性递送细胞毒部分如放射性核素、细胞毒药物或毒素的载体(18)。