[发明专利]一种固态罗伊氏乳杆菌微生态制剂的制备方法和应用

权利要求书

1.一种固态罗伊氏乳杆菌微生态制剂的制备方法，其特征在于，具体步骤如下：

(1)菌种的选择

选择罗伊氏乳杆菌在4℃条件下保存备用，所述的罗伊氏乳杆菌的保藏编号为CCTCC M2015660；

(2)MRS培养基的制备

将蛋白胨、牛肉膏、酵母膏、葡萄糖、吐温80、磷酸氢二钾、乙酸钠、柠檬酸氢二铵、硫酸镁、硫酸锰、蒸馏水，加热溶解，调节pH值为6.7，分装后，121℃高压蒸汽灭菌20min，备用；

(3)菌种的活化与种子液的获得

将保存在4℃的罗伊氏乳杆菌接种于MRS培养基上，37℃培养30-36h，如此连续活化3-5次后，再接种于MRS培养基中，37℃培养24h，得到菌种罗伊氏乳杆菌种子液；

(4)固态培养基的制备

将豆粕、豆粉、玉米粉、麸皮、甜菜碱、甘露糖混合均匀得到固态培养基；其中，固态培养基中各原料的重量百分比如下：豆粕：豆粉：玉米粉：麸皮：甜菜碱：甘露糖＝12-18:12-18:7-11:7.5-11.5:0.8-1.2:0.4-0.6；

(5)发酵

将菌种罗伊氏乳杆菌种子液按照5％的接种量接种到固态培养基中，并加入自来水，使得水分含量达50％，搅拌均匀后，放于37℃恒温箱中，固态发酵24-28小时；

(6)烘干：将固态发酵后的罗伊氏乳杆菌微生态制剂，放入恒温干燥箱中，干燥温度为37-45℃，摊开，使厚度不超过6厘米，烘至水份含量达到16-20％，即可装袋，密封保存。

2.根据权利要求1所述的固态罗伊氏乳杆菌微生态制剂的制备方法，其特征在于：步骤(2)中MRS培养基具体制备方法如下：将10.0g蛋白胨、10.0g牛肉膏、5.0g酵母膏、20.0g葡萄糖、1.0mL吐温80、2.0g磷酸氢二钾、5.0g乙酸钠，2.0g柠檬酸氢二铵、0.58g硫酸镁、0.25g硫酸锰、1000mL蒸馏水，加热溶解，调节pH值为6.7，分装后，121℃高压蒸汽灭菌20min，备用。

3.一种根据权利要求1-2任意一项所述的固态罗伊氏乳杆菌微生态制剂的制备方法得到的固态罗伊氏乳杆菌微生态制剂的应用，其特征在于：能够用于猪饲料的添加剂。