[发明专利]盐酸维拉佐酮中基因毒杂质的检测方法

说明书

本发明涉及一种盐酸维拉佐酮中基因毒杂质二(2‑氯乙基)胺及其盐酸盐的检测方法，采用气相色谱‑质谱联用色谱法进行测定，所述气相色谱采用交联聚乙二醇毛细管色谱柱；所述质谱采用电子轰击电离源，该检测方法灵敏度高、准确度高、耐用性好，可有效控制盐酸维拉佐酮中基因毒杂质二(2‑氯乙基)胺及其盐酸盐的质量，减少了患者用药副反应的发生，一定程度保证患者用药安全性。

技术领域

本发明属于医药技术领域，具体涉及一种盐酸维拉佐酮中基因毒杂质二(2-氯乙基)胺及其盐酸盐的检测方法。

背景技术

盐酸维拉佐酮(Vilazodone)，是由美国Trovis Pharmaceuticals LLC公司开发的一种具有双重作用的选择性5-HT再摄取抑制剂和5-HT1A受体部分激动剂，并于2011年1月被美国食品药品监督管理局批准上市，商品名为Viibryd，用于治疗成年人重度抑郁症，其结构式如下：

对于盐酸维拉佐酮的合成工艺，文献(TIMO H,HENNING B,ROLF G,etal.Synthesis and structure-activity relationship in a class ofindolebutylpiperacines as dual5-HT1A receptor agonists and sero toninreuptake inhibitors[J].J Med Chem,2004,47(19):4684-4692.)公开了如下目前医药技术领域比较认可且常用的合成工艺：

可见，该工艺中用到了二(2-氯乙基)胺(即(ClCH₂CH₂)₂NH)。另外，用二(2-氯乙基)胺盐酸盐作为中间体进行合成维拉佐酮的情况也非常普遍。根据欧盟联合研究中心(JRC)于2009年发表的题为“Development of structural alerts for the invo micronucleusasssy in rodents”的报告中，明确指出(R为任何原子或基团)为遗传毒性警示结构，故二(2-氯乙基)胺为潜在的基因毒杂质，具有遗传毒性，由于其终产物盐酸维拉佐酮有残留的可能，需严格控制其限度。

根据EMEA中《遗传毒性杂质限度指导原则》相关规定，其采用毒理学担忧阈值(threshold of toxicological concern,TTC)评价大部分药物的TTC值为遗传毒性杂质摄入量1.5μg/天。盐酸维拉佐酮的最大日服用剂量为40mg，所以盐酸维拉佐酮中含基因毒杂质的限度应为37.5ppm。但因其限度较低，检测较为困难，目前尚未有文献报道该基因毒杂质的检测方法。

因此，找到一种灵敏度高、专属性好的检测该基因毒杂质的方法，实现对盐酸维拉佐酮中该杂质的有效控制，从而在一定程度上保证盐酸维拉佐酮的质量和患者用药的安全性，具有重要研究意义。

发明内容

本发明的目的是提供一种盐酸维拉佐酮中基因毒杂质二(2-氯乙基)胺及其盐酸盐的检测方法，从而实现对盐酸维拉佐酮中该基因毒杂质的有效控制，以减少患者用药副反应的发生，保证用药安全性。

由于二(2-氯乙基)胺及其盐酸盐无紫外吸收，不能采用一般的液相色谱法进行测定。

鉴于二(2-氯乙基)胺具有挥发性，本发明人开始尝试采用气相色谱进行测定，但FID检测器对二(2-氯乙基)胺盐酸盐的定量限远高于盐酸维拉佐酮中含基因毒杂质的限度的限度，灵敏度达不到检测要求。