[发明专利]一种双嘧达莫合成的关键中间体杂质HPLC分析方法

说明书

本发明公开了一种双嘧达莫合成的关键中间体杂质HPLC分析方法，该方法以苯基硅烷键合硅胶为填料的色谱柱，以含有酸性添加剂的有机相为流动相A，含有酸性添加剂的水溶液为流动相B，采用梯度洗脱方法，检测波长为210‑230nm，对双嘧达莫关键中间体2,6‑二氯‑4,8‑二(哌啶‑1‑基)嘧啶并[5,4‑d]嘧啶及其相关杂质进行分离测定。该方法具有分离度好、简单快速、专属性强、灵敏度高，能够对双嘧达莫合成过程中的关键中间体二氯化物进行质量控制，使后处理简化并保证终产物的质量。

技术领域

本发明涉及药物化学及分析领域，具体涉及一种双嘧达莫合成的关键中间体杂质HPLC分析方法。

背景技术

双嘧达莫(Dipyridamole)，是一种抗血小板聚集和冠状动脉扩张药，它通过抑制腺苷的细胞吸收和代谢，提高环磷酸腺苷浓度等多种作用模式防止血栓的形成，与阿司匹林联合使用有协同扩张冠状血管及降低血小板凝聚作用，临床上主要用于防止脑血栓的形成、降低心肌梗塞的治疗，为心脑血管治疗领域的主要用药，化学结构式如下：

式2为双嘧达莫的合成路线及合成过程的杂质谱分析谱图。从图中可以看出，整个合成过程是首先通过四氯化物(2,4,6,8-四氯嘧啶并[5,4-d]嘧啶)与哌啶缩合生成关键中间体二氯化物(2,6-二氯-4,8-二(哌啶-1-基)嘧啶并[5,4-d]嘧啶)，随后二氯化物与二乙醇胺缩合生成双嘧达莫产物。不难发现，在整个反应过程中，随着关键中间体二氯化物(2,6-二氯-4,8-二(哌啶-1-基)嘧啶并[5,4-d]嘧啶)的产生，出现了大量的副反应杂质产物，主要有一氯化物(2-氯-4,6,8-三(哌啶-1-基)嘧啶并[5,4-d]嘧啶)、三氯化物(2,4,6-三氯-8-(哌啶-1-基)嘧啶并[5,4-d]嘧啶)、四氯化物(2,4,6,8-四氯嘧啶并[5,4-d]嘧啶)。

近年来，为了提高产率、纯度及更适合于商业化生产，双嘧达莫的合成工艺得到了很多改进，如美国专利US 8946414 B2公开的一种双嘧达莫的制备工艺以及中国专利201510118075.4中公开的一种双嘧达莫纯化工艺的报道，但其中所针对的均是二氯化物与二乙醇胺反应的改进及对所得到的双嘧达莫粗品的纯化。

此外，现行的欧洲药典(EP 8.0)中规定了特定杂质，即杂质A、B、C、D、E、F、G，虽然与二乙醇胺缩合后生成的双嘧达莫粗品及后续精制过程的有关物质水平可以采用此标准进行监控，但二氯化物作为合成双嘧达莫前一步的中间体，其杂质水平的高低直接决定了成品的质量以及后续处理程度的难易。

因此，根据杂质需从源头控制的理念考虑，有必要建立一种新的用于双嘧达莫合成质量控制的关键中间体杂质分析方法，即基于对二氯化物前后步骤中的杂质进行监测和控制，使杂质能由工艺上得到有效控制，从而便于后处理，保证后续产品的质量。该方法有利于加强双嘧达莫产品内控质量，为工艺条件的优化提供必要的理论和实践依据。

发明内容

本发明的目的在于建立一种用于双嘧达莫合成质量控制的关键中间体杂质分析方法，该方法具有分离度好、简单快速、专属性强、灵敏度高，能够对双嘧达莫合成过程中的关键中间体二氯化物进行质量控制，使后处理简化并保证终产物的质量。

为了达到上述目的，本发明采用高效液相色谱法(HPLC)，其通过如下技术方案实现:

以苯基硅烷键合硅胶为填料的色谱柱，以含有酸性添加剂的有机相为流动相A，含有酸性添加剂的水溶液为流动相B，采用梯度洗脱方法，检测波长为210-230nm,对双嘧达莫关键中间体二氯化物(2,6-二氯-4,8-二(哌啶-1-基)嘧啶并[5,4-d]嘧啶)及其杂质进行分离测定。