[发明专利]哮喘颗粒中有效成分的检测方法

说明书

本发明涉及药物分析技术领域，尤其涉及哮喘颗粒中有效成分的检测方法。本发明提供了对哮喘颗粒中有效成分的定量及定性检测方法，以本发明提供的方法，能够对其中10种有效成分进行定性，其中7种有效成分进行定量，各物质间分离度不低于1.5。采用本发明提供的方法能够对其中7种有效成分进行定量，加标回收率位于97.29％～103.78％之间，具有良好的准确性。

技术领域

本发明涉及药物分析技术领域，尤其涉及哮喘颗粒中有效成分的检测方法。

背景技术

哮喘颗粒是由江苏康缘药业股份有限公司开发的治疗过敏性哮喘的中药，该药物于2015年12月6日提出专利申请，申请号为CN201510885057.9。该药物由防风、紫苏叶、炙麻黄、五味子、白果、苦杏仁、紫苑、山萸肉、辛夷制成。具体制备方法为将紫苏叶、辛夷用水蒸气蒸馏法提取挥发性成分，采用β-环糊精包合后备用，药渣与防风、炙麻黄、苦杏仁合并，分别加水煎煮2-3次，每次1-3小时，合并提取液，浓缩成50℃条件下相对密度为1.10～1.15的清膏，醇沉至醇含量60％-70％，取上清液浓缩制成50℃条件下相对密度为1.25～1.30的清膏备用；五味子、白果、紫菀、山萸肉用60％-70％乙醇提取2-3次，每次1-3小时，合并醇提液，浓缩制成50℃条件下相对密度为1.25～1.30的清膏；将上述各清膏合并，干燥，粉碎，加入挥发油包合物，混匀，即得(具体参见申请号为CN201510885057.9的专利申请文件实施例1)。实验表明，哮喘颗粒具有疏风缓急利窍，肃肺平喘的功效。主要用于哮喘之“风邪伤肺，肃降失常，气道挛急”之突发或反复发作，或过敏因素而致喘息憋闷、气短、气息急迫，喉中哮鸣有声等支气管哮喘急性发作等症状。

为了能够更好的控制药品的质量，保证临床的疗效，药物生产过程中必须掌握药物的有效成分及其含量。但由于哮喘颗粒的成分复杂，其中有效成分主要包括苷类、生物碱类、木脂素类、挥发油类等成分，且其中还包括大量的辅料成分β-环糊精。由于检测目标成分复杂，各有效成分物理、化学性质差异较大，又存在大量的辅料感扰。以目前的检测方法尚无法对哮喘颗粒中的有效成分进行有效定量或定性检测。

发明内容

有鉴于此，本发明要解决的技术问题在于提供哮喘颗粒中有效成分的检测方法，本发明提供的方法具有良好的精密度、线性关系、稳定性、重复性，回收率高，耐用性良好；哮喘颗粒指纹图谱的分离度、重现性均较好，信息全面，标示出20个共有峰，对其中10个成分进行定性，各批次样品相似度在0.90以上。本发明建立的哮喘颗粒中7种成分的含量测定及指纹图谱研究方法为哮喘颗粒的质量控制提供依据；该方法简便可行、快速准确，可以作为评价哮喘颗粒质量的有效方法。

本发明提供了哮喘颗粒中有效成分的检测方法，哮喘颗粒经前处理后，以甲醇为流动相A相，以乙腈为流动相B相，以水为流动相C相，以HPLC法检测获得色谱图，根据色谱图获得有效成分的种类及含量。

前处理是进行HPLC上机检测前的必须步骤，是为了去除干扰样品分析的杂质，提高分析的精度和分离效果，并提高样品与流动相的兼容性。而如果前处理不当，则会导致分离效果变差，检测基线偏高等一系列问题。

本发明中，前处理具体为：将哮喘颗粒以甲醇水溶液提取后过滤；所述提取为超声辅助提取。

前处理过程中，哮喘颗粒与甲醇水溶液的质量体积比为1g：15mL～1g：50mL。

本发明实施例中，哮喘颗粒与甲醇水溶液的质量体积比为1g：25mL。

超声提取过程中，甲醇会发生挥发，提取后，用甲醇补足损失的体积。

前处理过程中提取哮喘颗粒的甲醇水溶液中甲醇的体积比为30％～80％。

本发明实施例中，前处理过程中提取哮喘颗粒的甲醇水溶液中甲醇的体积比为50％。

前处理过程中，超声辅助提取的功率为200W，频率为40kHz，时间为30min～60min。