[发明专利]哮喘颗粒中有效成分的检测方法有效
申请号: | 201610697728.3 | 申请日: | 2016-08-19 |
公开(公告)号: | CN107764924B | 公开(公告)日: | 2020-01-31 |
发明(设计)人: | 萧伟;林夏;胡军华;于桂芳;潘有智;李家春;黄文哲;王振中 | 申请(专利权)人: | 江苏康缘药业股份有限公司 |
主分类号: | G01N30/88 | 分类号: | G01N30/88;G01N30/06 |
代理公司: | 11227 北京集佳知识产权代理有限公司 | 代理人: | 赵青朵 |
地址: | 222047 江苏省*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 哮喘 颗粒 有效成分 检测 方法 | ||
1.哮喘颗粒中有效成分的检测方法,其特征在于,哮喘颗粒经前处理后,以甲醇为流动相A相,以乙腈为流动相B相,以水为流动相C相,以HPLC法检测获得色谱图,根据色谱图获得有效成分的种类及含量;
所述哮喘颗粒由防风、紫苏叶、炙麻黄、五味子、白果、苦杏仁、紫菀、山萸肉、辛夷制成;所述有效成分包括:木兰脂素、莫诺苷、马钱苷、升麻素苷、5-O-维斯阿米醇苷、五味子醇甲、五味子醇乙、五味子酯甲、五味子甲素和五味子乙素;
所述HPLC法的色谱柱为C18柱,洗脱程序为:
0min~2min流动相A相体积分数为15%;
流动相B相的体积分数为2%;
流动相C相的体积分数为83%;
2min~16min流动相A相体积分数由15%至54%;
流动相B相的体积分数为2%;
流动相C相的体积分数由83%至44%;
16min~30min流动相A相体积分数为由54%至72%;
流动相B相的体积分数为2%;
流动相C相的体积分数由44%至26%;
30min~36min流动相A相体积分数为由72%至98%;
流动相B相的体积分数为2%;
流动相C相的体积分数由26%至0。
2.根据权利要求1所述的检测方法,其特征在于,所述前处理具体为:将哮喘颗粒以甲醇水溶液提取后过滤;所述提取为超声辅助提取。
3.根据权利要求2所述的检测方法,其特征在于,所述哮喘颗粒与甲醇水溶液的质量体积比为1g:15mL~1g:50mL。
4.根据权利要求2所述的检测方法,其特征在于,所述甲醇水溶液中甲醇的体积比为30%~80%。
5.根据权利要求2所述的检测方法,其特征在于,所述超声辅助提取的功率为200W,频率为40kHz,时间为30~60min。
6.根据权利要求1所述的检测方法,其特征在于,所述HPLC的色谱柱为Kromasil 100-3.5 C18。
7.根据权利要求1所述的检测方法,其特征在于,所述HPLC法检测的柱温为38℃~42℃;所述流动相的流速为0.8~1.2mL·min-1。
8.根据权利要求1所述的检测方法,其特征在于,所述HPLC法检测的波长为210nm和240nm。
9.根据权利要求1~8任一项所述的检测方法,其特征在于,根据所述色谱图的相对保留时间对有效成分定性;其中,
相对保留时间为0.358±20%的有效成分为莫诺苷;
相对保留时间为0.569±20%的有效成分为马钱苷;
相对保留时间为0.717±20%的有效成分为升麻素苷;
相对保留时间为1的有效成分为5-O-维斯阿米醇苷;
相对保留时间为1.416±20%的有效成分为木兰脂素;
相对保留时间为1.511±20%的有效成分为五味子醇甲;
相对保留时间为1.641±20%的有效成分为五味子醇乙;
相对保留时间为1.808±20%的有效成分为五味子酯甲;
相对保留时间为1.95±20%的有效成分为五味子甲素;
相对保留时间为2.113±20%的有效成分为五味子乙素。
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