[发明专利]一种多巴胺固相萃取耗材及其制备方法

说明书

技术领域

本发明专利涉及制备固相萃取耗材。

技术背景

固相萃取是分析样品预处理技术发展的热点，可以用于样品中分析物的分离、纯化和富集。固相萃取可用于气体、液体和固体样品的处理，广泛的应用在医疗、食品安全、环境检测、商品检验、化工质控等领域。近年来，微萃取方法得到了长足的发展，与传统的大型萃取法相比，微萃取回收率更高，分离更有效，速度更快、萃取相用量更少、选择性更高、预处理过程更简单，操作更方便。并具有自动化以及与色谱、电泳等检测手段联用的可能。然而，固相材料在萃取耗材上的固化始终是个问题。传统方法使用化学粘合剂来固定萃取相，然而所得萃取液如要应用于医药食品领域就存在安全隐患。另一种固定萃取材料的方法使用单层或多层滤膜，该技术制备工艺较繁琐，多孔滤膜本身性质不同于萃取材料，从而人为相成多层不均一介质并对分析物的吸附和洗脱产生干扰。本发明成功地使用生物粘合剂多巴胺固化萃取材料，无须滤膜层，减少死体积，准确控制分析洗脱时间，缩小样品损失。

多巴胺是一种天然粘合剂，广泛存在于海洋贝类动物的分泌物中。多巴胺的化学式为C6H3(OH)2-CH2-CH2-NH2，是具备苯环，双酚基和氨基的小分子物质。研究已经证明，在合适的pH条件下，多巴胺可以在各种材料表面进行自聚合，形成聚多巴胺层。这也就是为什么贝类动物可以在风浪的多次冲击下仍能紧紧的附着于坚硬的岩石上。粘合过程涉及不同层次的强弱相互作用，包括氢键作用、螯合作用、相互作用和共价作用。对其的研究已成为生物粘合剂应用和发展的一个重要方向。

发明内容

本发明使用多巴胺的自聚合作用来固定萃取相，制备固相萃取和固相微萃取耗材。粘合时多巴胺溶于溶液，所用溶液可以是纯水、硫酸盐、盐酸盐、硝酸盐、磷酸盐、硼酸盐、碳酸盐，三羟甲基氨基甲烷、铵盐以及甘氨酸、TRICINE、BICINE、TES、CHES、HEPES、MES、MOPs等两性缓冲溶液。

粘结前多巴胺溶液浓度大于1毫克/毫升。pH值介于5-12之间，较佳范围6-9.5。

制备的萃取耗材包括移液枪吸头、多孔样品处理板、注射器、碟状萃取盘、其他可能形状的容器以及微米或纳米级别颗粒。

萃取耗材制备过程中，先用物理方法在萃取容器中制造小的仅供液体流动的空间，物理方法包括使用滤膜，形成小孔，压力形成缝隙等方法。加入适量萃取固相后，随后加入多巴胺溶液，停留适当时间后，多余多巴胺溶液压力或重力排出。

上述方法也可以用于形成短的滤膜层和滤芯层，随后其上可以叠加更多同种萃取材料，或其他种类的萃取材料形成复合萃取设备。

萃取材料固化后，萃取容器中原有的仅供液体流动的缝隙结构可以切除，也可以保留。

附图说明

为了更清楚地说明本发明实施例中的技术方案，下面将对实施例描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本发明的一些实施例。其中：

1、图1是实例1为萃取所得的葡聚糖阶梯；

2、图2是实例2为萃取所得的葡聚糖阶梯;

3、图3中实例3 为萃取所得的特定蛋白。

具体实施方式

下面将对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅是本发明的一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其它实施例，都属于本发明保护的范围。

实例1 制备多孔石墨吸头进行寡糖纯化

1．多孔石墨混合溶液形成悬浮溶液。移液枪吸头出口形成小孔。加入适量石墨悬浮液，除去液体。加入适量配制好的盐酸多巴胺溶液。

2．静止五分钟，移出溶液。随后等待吸头中萃取材料固化。

3. 寡糖纯化前分别用适量NaOH溶液，醋酸溶液和乙晴清洗吸头内萃取材料。

4. 加含寡糖样品，使样品紧密接触碳层,等五分钟再用真空或重力缓慢推出样品溶液.

5. 使用纯水和醋酸溶液清洗吸头内萃取材料。

6．使用50 μL的析出液清洗吸头，收集流出溶液进行色谱分析。

实例2制备离子交换树脂吸头进行寡糖纯化

1．离子交换树脂形成悬浮溶液。移液枪吸头出口形成小孔。迅速加入适量树脂悬浮液，除去液体。加入适量配制好的盐酸多巴胺溶液。

2．静止一段时间，移出溶液。随后等待吸头中萃取材料固化。

3．加入更多树脂悬浮溶液，扩大吸附层体积。