[发明专利]一种从茯苓中制备猪苓酸C的方法

说明书

本发明公开了从茯苓中制备猪苓酸C的方法，以茯苓为原料，经粉碎、提取、过滤、浓缩、萃取，萃取物首先经过真空液相层析进行粗分，制得猪苓酸C粗产物，猪苓酸C粗产物再经动态轴向压缩色谱技术进行分离纯化，制得猪苓酸C较纯品，最后经重结晶得到猪苓酸C。与现有的工艺方法相比，本发明方法具有工作效率高、粗提溶剂成本低、填料分离精度高、可反复利用、层析溶剂成本低、对环境污染相对较轻、猪苓酸C纯度高等优点，适合工业型制备。

技术领域

本发明属于中药现代化领域，具体涉及一种从茯苓中制备猪苓酸C的方法。

背景技术

茯苓又称玉灵、茯灵、万灵桂、茯菟，为多菌科真菌Poriacocos(Schw.)Wolf的菌核，性平，味甘、淡，具有利水渗湿，健脾宁心作用，用于水肿尿少、痰饮眩悸、脾虚食少、便溏泄泻、心神不安、惊悸失眠。

现代药理研究表明，茯苓具有增强免疫、延缓衰老、抗肿瘤、抗病毒、抗炎等作用。目前，从茯苓中分离出多种化学成分，主要包括多糖类及萜类化合物，除此之外，还含有甾体类化合物、脂肪酸、蛋白质、腺嘌呤、氨基酸及多种无机元素等。已有研究表明从茯苓中分离得到的猪苓酸C具有抗肿瘤及增强免疫功能的作用，现有分离纯化猪苓酸C的方法，大多采用传统的常压硅胶色谱分离，普遍产率低，纯度差，针对不强，不能满足大批量制备的需求。

发明内容

本发明的目的在于一种从茯苓中制备猪苓酸C的方法。

本发明的目的是通过以下技术方案实现的：

一种从茯苓中制备猪苓酸C的方法，它以茯苓为原料，经粉碎、提取、过滤、浓缩、萃取，萃取物首先经真空液相层析进行粗分制得猪苓酸C粗产物，猪苓酸C粗产物再经动态轴向压缩色谱技术进行分离纯化，制得猪苓酸C较纯品，最后经重结晶得到高纯度猪苓酸C。

本发明所述的一种从茯苓中制备猪苓酸C的方法，具体包括以下步骤：

(1)茯苓块粉粹成粉末，加入茯苓粉末10～20倍重量体积的提取溶剂，回流提取3～5次，每次1～3小时，得提取液；

(2)合并提取液，过滤，得到的滤液减压浓缩，得到浓缩液；

(3)浓缩液用等体积的乙酸乙酯萃取3～5次，乙酸乙酯萃取层减压浓缩，得到乙酸乙酯部位稠浸膏；

(4)乙酸乙酯部位稠浸膏加入硅胶拌样，得到样品硅胶A；

(5)样品硅胶A采用真空液相层析进行粗分，得到猪苓酸C粗产品；

条件为：层析柱规格为100×800mm，填料为200～300目柱层析硅胶，真空压力为0.04-0.08MPa，以石油醚:乙酸乙酯＝5:1为洗脱剂洗脱4BV除杂，再以石油醚:乙酸乙酯＝3:1～1:1为洗脱剂洗脱，收集洗脱液，减压浓缩干燥，得到猪苓酸C粗产品；

(6)猪苓酸C粗产品用甲醇溶解，加入硅胶拌样，得到样品硅胶B；

(7)样品硅胶B采用动态轴向压缩色谱技术(DAC)进行分离纯化得到猪苓酸C较纯品；

条件为：色谱柱为正相色谱柱，规格为(50-150)×(300-1000)mm，填料为柱层析硅胶200～300目；气压表设置为50-80psi，油压表设置为1500-2000psi；检测波长为238nm；

以石油醚:乙酸乙酯:冰醋酸＝65:10:1～55:10:1为起始洗脱剂，流速为30～100mL/min，充分洗脱3～5个保留体积，除杂；再以石油醚:乙酸乙酯:冰醋酸＝55:10:1～35:10:1为洗脱剂，进行洗脱，流速为30～100mL/min，于238nm波长下监视流出曲线以指导产品收集，收集液经浓缩干燥后，得到猪苓酸C较纯品；

(8)步骤(7)获得的猪苓酸C较纯品用无水乙醇溶解完全，过滤，滤液在温度-4～5℃结晶，过滤得到猪苓酸C晶体。