[发明专利]高度糖基化CEA特异性结合的单链抗体及其在检测和治疗上的应用

权利要求书

1.嵌合抗原受体(CAR)，其中所述CAR包括:

i)靶向糖基化CEA的抗原结合结构域；

ii)跨膜结构域，和

iii)细胞内信号传导结构域，其包含共刺激结构域，

其中所述靶向糖基化CEA的抗原结合结构域包含一重链可变区及一轻链可变区，其特征在于，

所述重链可变区包含：由SEQ ID NO:13所示的CDR-H1、由SEQ ID NO:14所示的CDR-H2和由SEQ ID NO:15所示的CDR-H3；同时所述轻链可变区包含：由SEQ ID NO:16所示的CDR-L1、由SEQ ID NO:17所示的CDR-L2和由SEQ ID NO:18所示的CDR-L3。

2.权利要求1所述的嵌合抗原受体，其中所述重链可变区包含由SEQ ID NO:35所示的多肽片段，同时所述的轻链可变区包含由SEQ ID NO:36所示的多肽片段。

3.权利要求1所述的嵌合抗原受体，其中所述抗原结合结构域是特异性识别人糖基化CEA的单链抗体，其中所述单链抗体的氨基酸序列是SEQ ID NO:173或SEQ ID NO:178。

4.权利要求1-3任一项所述的嵌合抗原受体，其中跨膜结构域包括CD8α和/或CD28，所述细胞内信号传导结构域包含CD28，CD137，和CD3zeta中的一种或多种，其中CD8α铰链区由SEQ ID NO:52所示序列编码，CD8α跨膜区由SEQ ID NO:54所示序列编码，CD28铰链区由SEQID NO:53所示序列编码，CD28跨膜区由SEQ ID NO:55所示序列编码，CD28共刺激结构域由SEQ ID NO:56所示序列编码，CD137共刺激结构域由SEQ ID NO:57所示序列编码，CD3zeta由SEQ ID NO:58所示序列编码。

5.编码权利要求1-4任一项所述的嵌合抗原受体的核酸分子。

6.表达权利要求1-4任一项所述的嵌合抗原受体的细胞，其中所述细胞选自T细胞、NK细胞和B细胞。

7.特异性结合人糖基化CEA的单链抗体，所述单链抗体包含一重链可变区及一轻链可变区，其特征在于，所述重链可变区包含：由SEQ ID NO:13所示的CDR-H1、由SEQ ID NO:14所示的CDR-H2和由SEQ ID NO:15所示的CDR-H3；同时所述轻链可变区包含：由SEQ ID NO:16所示的CDR-L1、由SEQ ID NO:17所示的CDR-L2和由SEQ ID NO:18所示的CDR-L3。

8.权利要求7所述的单链抗体，其中所述重链可变区包含由SEQ ID NO:35所示的多肽片段，同时所述的轻链可变区包含由SEQ ID NO:36所示的多肽片段。

9.权利要求7或8所述的单链抗体，其中所述单链抗体的氨基酸序列是SEQ ID NO:173或SEQ ID NO:178。

10.权利要求1-4任一项所述的嵌合抗原受体或权利要求6所述的细胞或权利要求7-9任一项所述的单链抗体在制备用于诊断肿瘤的试剂或治疗肿瘤的药物中的用途，其中所述肿瘤为消化道肿瘤。

11.权利要求10所述的用途，其中所述肿瘤选自胃癌、结直肠癌或食道癌。