[发明专利]一种食品中草甘膦、氨甲基膦酸及草铵膦的测定方法

说明书

本发明公开了一种食品中草甘膦、氨甲基膦酸及草铵膦的测定方法，是试样以盐酸化的超纯水提取，粗提取液经二氯甲烷液液分配后，经亲脂亲水性共聚物固相萃取柱净化，除去杂质，在pH 9条件下与9‑芴甲基氯甲酸酯[FMOC‑Cl]衍生化反应，超高效液相色谱串联质谱（UPLC/MS/MS）检测，外标法定量，草甘膦、氨甲基膦酸及草铵膦残留的平均回收率在72%~116%，相对标准偏差RSD≤10%，本发明操作简便、重现性好，有效去除样品提取液中的杂质，能够快速的对食品中草甘膦、氨甲基膦酸及草铵膦三种农药同时进行定性、定量分析，满足安全检测的技术要求，为食品安全及对外出口贸易提供有力的技术支撑。

技术领域

本发明属于食品检测方法技术领域，尤其涉及一种食品中草甘膦、氨甲基膦酸及草甘膦的测定方法。

背景技术

草甘膦（Glyphosate）和草铵膦（Glufosinate ammonium）均为广谱性的除草剂，近年来随着草甘膦抗性杂草问题的日益严重，草铵膦凭借其有效性成为近期最热门产品之一。为提高杂草防除效果，国内外均有草甘膦和草铵膦复配产品的研发与登记，用于提高杂草防除效果。国内外草甘膦、草铵膦、或两者相关复配产品的使用量逐年增加，其残留问题越来越受到关注。

草甘膦及其主要降解产物氨甲基膦酸(Aminomethyl phosphonic acid, AMPA)和草铵膦之间化学结构相似，都具有易溶于水,难溶于一般有机溶剂，难挥发,缺少发色和荧光基团等特性,因此运用常规方法进行检测比较困难。我们国家的标准只能检测草甘膦及其代谢物氨甲基膦酸，目前尚无食品中草铵膦检测方法的国家标准，例如GB/T 23750-2009《植物性产品中草甘膦残留量的测定 气相色谱-质谱法》、NY/T 1096-2006 《食品中草甘膦残留量测定》、SN/T 1923-2007 《进出口食品中草甘膦残留量的检测方法 液相色谱-质谱质谱法》，按照上述三个标准中利用液相色谱-质谱检测食品中的草甘膦残留时，实验过程试剂耗用量大、操作步骤极多，尤其是使用阳离子交换柱（CAX），洗脱液洗脱，该柱价格较为昂贵，柱体积大，吸附容量小，净化后仍然存在大量杂质，且方法中洗脱液体积大且水占比例大，在浓缩时不易蒸干，加压旋转蒸干过程易造成草甘膦回收率不稳定，在实际工作中需要耗费大量的时间和精力。

国内针对草甘膦、氨甲基膦酸及草铵膦三种农药同时检测的报道仅限于茶叶和饮用水中，缺少应用于食品中三种农药同时检测的方法研究。因此建立快速、有效、灵敏、可靠且实用的残留分析方法对于食品安全具有重要的现实意义。

发明内容

本发明针对上述现有技术中存在的不足，提供一种利用液液萃取技术、固相萃取技术、结和衍生化技术，对样品进行预处理，检测快速高效且结果准确的食品中草甘膦、氨甲基膦酸及草铵膦同时检测的方法。

本发明解决上述技术问题的技术方案如下：一种食品中草甘膦、氨甲基膦酸及草甘膦的测定方法，包括以下步骤：

（1）提取：称取样品到塑料离心管中，加入超纯水和盐酸溶液 ，充分涡旋混匀，加入二氯甲烷共同超声提取，进行离心；

（2）净化：将步骤（1）离心后得到的水溶液过含有亲脂亲水性共聚物的固相萃取柱净化，待衍生；

（3）衍生：将步骤（2）得到的净化液调整pH值到9.0，加入9-芴甲基氯甲酸酯[FMOC-Cl]乙腈溶液，衍生化反应；

（4）衍生物净化：将步骤（3）得到的衍生液，加入二氯甲烷，涡旋振荡、高速离心后，上清液过滤膜，滤入塑料进样瓶中，待上机检测；

（5）UPLC/MS/MS检测：

仪器条件：

超高效液相流动相：A：含0.1%氨水5mM乙酸铵水溶液+乙腈（100+5，V/V），B：乙腈

离子源：ESI+