[发明专利]一种食品中草甘膦、氨甲基膦酸及草铵膦的测定方法

权利要求书

1.一种食品中草甘膦、氨甲基膦酸及草铵膦的测定方法，其特征在于包括以下步骤：

（1）提取：称取样品到塑料离心管中，加入超纯水和盐酸溶液，充分涡旋混匀，加入二氯甲烷共同超声提取，进行离心；

（2）净化：将步骤（1）离心后得到的水溶液过含有亲脂亲水性共聚物的固相萃取柱净化，待衍生；

（3）衍生：将步骤（2）得到的净化液调整pH值到9.0，加入9-芴甲基氯甲酸酯[FMOC-Cl]乙腈溶液，衍生化反应；

（4）衍生物净化：将步骤（3）得到的衍生液，加入二氯甲烷，涡旋振荡、高速离心后，上清液过滤膜，滤入塑料进样瓶中，待上机检测；

（5）UPLC/MS/MS检测：

仪器条件：

超高效液相流动相：A：含0 .1%氨水5mM乙酸铵水溶液+乙腈（100+5，V/V），B：乙腈

离子源：ESI+

色谱柱：ACQUITY UPLC^TM BEH C18 2.1×50 mm×1.8μm Column

色谱条件：

质谱条件：多反应监测（MRM）扫描模式，其中带*为定量离子

步骤（1）中所述的提取是称取均匀制样的样品5.0g于50mL离心管中，加入20 mL超纯水， 2mol/L盐酸溶液2.0 mL , 充分涡旋混匀，再加入二氯甲烷10 mL，涡旋混合均匀后 ，超声提取20min，4000 r/min离心5 min；

步骤（2）中所述的净化是将步骤（1）离心后得到的水溶液 5 .0 mL过含有亲脂亲水性共聚物的固相萃取柱，净化，直接收集，该固相萃取柱依次用6 mL甲醇、6 mL 0.1%的甲酸水、3 mL步骤（1）的提取液预处理；

步骤（3）中所述的衍生是将步骤（2）所收集的净化液吸取1.0 mL至2mL PP离心管中，加入 20μL ~ 60μL20% 的氢氧化钠溶液调至pH 值到9，再加入 200μL 5% 硼砂溶液，震荡混合均匀，再加入200μL 10g/L 的9-芴甲基氯甲酸酯[FMOC-Cl]乙腈溶液，震荡混合均匀，室温下放置4小时衍生；

步骤（4）中所述的衍生物净化是将300μL二氯甲烷加入步骤（3）衍生后的溶液中，涡旋震荡1 分钟，混合均匀，于10000 rpm 高速离心2分钟，吸取上清液过0.2 μm 针筒式亲水PTFE滤膜，滤入2mL塑料进样瓶中，按照步骤（5）中所述仪器条件，上机检测。