[发明专利]一种白花虎眼万年青的组织培养快速繁殖方法

权利要求书

1.一种白花虎眼万年青的组织培养快速繁殖方法，其特征在于，选取白花虎眼万年青的叶片作为组培用的外植体；通过叶片表面珠芽诱导培养形成种苗，或者通过叶片愈伤组织诱导培养、不定芽诱导培养、生根培养形成种苗；待种苗长出不定根后，进行组培苗驯化移栽，然后正常培养；具体包括以下步骤：

步骤1，外植体的选择及处理

选取白花虎眼万年青的叶片为起始材料，将采集到的叶片切成2～4cm的叶段，作为组培用的外植体；

步骤2，对叶片进行诱导形成种苗

将经过表面消毒的外植体接种于珠芽诱导培养基MS+TDZ2.0mg/L上在光照处培养，待叶片表面逐渐形成完整的根系后，将根系插入培养基中成为新的种苗；

或者，将经过表面消毒的外植体接种于愈伤组织诱导培养基MS+2,4D2.0mg/L上进行暗培养，待叶片切口处形成白色或淡黄色的愈伤组织，然后接种于不定芽诱导培养基MS+6BA2.0mg/L，放在光照处培养，愈伤组织逐渐形成不定芽，再将其转接到生根培养基MS+IBA1.0mg/L上，20～30d后，生根成苗成为新的种苗；

步骤3，组培苗驯化移栽

待种苗长出3～5条2～3cm的不定根后，进行炼苗，然后将组培苗移栽到培养基质中进行缓苗，再正常培养。

2.如利要求1所述的白花虎眼万年青的组织培养快速繁殖方法，其特征在于，培养温度为25℃。

3.如利要求1所述的白花虎眼万年青的组织培养快速繁殖方法，其特征在于，光照时间为12～14h/d，光照强度为40～60u.Mol.m^-2.s^-1。

4.如利要求1所述的白花虎眼万年青的组织培养快速繁殖方法，其特征在于，珠芽诱导、愈伤组织诱导、不定芽诱导及生根培养，所用的基本培养基均为MS培养基，蔗糖用量为20～40g/L，凝固剂为琼脂粉、用量为6～7g/L，培养基pH为5.8。

5.如利要求1所述的白花虎眼万年青的组织培养快速繁殖方法，其特征在于，所述炼苗具体为：先在组培室打开瓶盖炼苗3天，然后将其移至温室或荫棚，再炼苗3天。

6.如利要求1所述的白花虎眼万年青的组织培养快速繁殖方法，其特征在于，所述培养基质由沙壤土与草炭土按质量比3:1组成。

7.如利要求1或6所述的白花虎眼万年青的组织培养快速繁殖方法，其特征在于，所述培养基质的含水量25％以内，空气相对湿度80～90％。