[发明专利]一种快速筛选植物中痕量紫杉醇类活性物质的方法

权利要求书

1.一种快速筛选植物中痕量紫杉醇类活性物质的方法，其特征在于，包括如下步骤：

(1)将植物样品经有机溶剂超声萃取，得到植物萃取液；所述植物样品为乔木、草本植物及食用菌；

(2)将所述步骤(1)得到的植物萃取液先后经过未活化的碳纤维材料和活性炭纤维，得到吸附有植物紫杉醇类活性物质的未活化的碳纤维材料和活性炭纤维材料；

(3)采用第一流动相洗脱所述步骤(2)得到吸附有植物紫杉醇类活性物质的未活化的碳纤维材料和活性炭纤维材料，得到第一组分洗脱液，将所述第一组分洗脱液在线进行离子化，筛选得到第一紫杉醇前体物，所述第一紫杉醇前体物包括巴卡亭III和10-脱乙酰基巴卡亭III；

所述第一流动相包括体积终浓度为0.05～0.2％的甲酸溶液与体积终浓度为8～12％的甲醇溶液；

(4)采用第二流动相洗脱所述步骤(3)得到活性炭纤维材料，得到第二组分洗脱液，对所述第二组分洗脱液进行离子化，得到第二紫杉醇前体物，所述第二紫杉醇前体物包括紫杉醇、7-木糖基-10脱乙酰基紫杉醇、7-木糖基-紫杉醇、三尖杉宁碱和7-表-10-脱乙酰基紫杉醇；

所述第二流动相包括体积终浓度为0.05～0.2％的甲酸溶液与体积浓度为55～70％的甲醇终溶液。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤(1)中有机溶剂为甲醇；

所述甲醇的体积浓度为99.9％。

3.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于，所述步骤(1)中超声萃取的温度为18～25℃，所述超声萃取的时间15min/次，萃取3次，每次间隔时间为5～10min。

4.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于，所述步骤(1)中超声萃取后还包括：将所述萃取得到的物料经过滤膜过滤；

所述滤膜的孔径为0.22μm、0.45μm或0.6μm。

5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，所述滤膜的孔径为0.45μm。

6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤(3)中第一流动相的流速为1.5～3.5mL/h；

所述步骤(4)中第二流动相的流速为1.5～3.5mL/h。

7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，所述步骤(3)中第一流动相的流速为2.5mL/h。

8.根据权利要求1或6所述的方法，其特征在于，所述步骤(4)中第二流动相的流速为2.5mL/h。

9.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述第一流动相包括体积终浓度为0.01％的甲酸溶液与体积终浓度为10％的甲醇溶液。

10.根据权利要求1或9所述的方法，其特征在于，第二流动相包括体积终浓度为0.01％的甲酸溶液与体积浓度为60％的甲醇终溶液。