[发明专利]一种利用固氮菌、解磷菌和解钾菌共同发酵制备生物有机肥的方法

权利要求书

1.一种利用固氮菌、解磷菌和解钾菌共同发酵制备生物有机肥的方法，其特征在于，

1）将固氮菌、解磷菌和解钾菌三种菌分别经过一级菌种与二级菌种的单独扩繁；

2）将三种菌的二级菌种进行混合接种培养得到三级混合菌种；

3）将三级混合菌种接种于发酵培养基进行发酵培养；

4）将发酵好的三级混合菌种接种于玉米秸秆、畜禽粪便农业废弃物中进行二次发酵， 便得到生物有机肥。

2.根据权利要求1所述利用固氮菌、解磷菌和解钾菌共同发酵制备生物有机肥的方 法，其特征在于，所述固氮菌为圆褐固氮菌，解磷菌为酿酒酵母菌或巨大芽孢杆菌，解钾菌 为胶质芽孢杆菌；圆褐固氮菌、酿酒酵母菌、巨大芽孢杆菌和胶质芽孢杆菌的试管菌种单独 保存于温度为3-6℃的菌种保藏柜中。

3.根据权利要求1所述利用固氮菌、解磷菌和解钾菌共同发酵制备生物有机肥的方 法，其特征在于，所述步骤1）中的扩繁所采用的培养基和步骤2）中的混合培养接种所采用 的培养基均为：

按培养基总体积比计为麸皮3.0g/L-8.0g/L、豆粕1.0g/L-5.0g/L、玉米粉2.0g/L- 8.0g/L、稻草粉1.0g/L-6.0g/L、硝酸铵0.5g/L-2.0g/L、硫酸镁0.1g/L-0.2g/L、磷酸 二氢钾0.1g/L-0.3g/L和磷酸氢二钾0.1g/L-0.2g/L；以及微量元素：Fe³⁺0.001 mol/L-0.003mol/L、Mn²⁺0.003mol/L-0.005mol/L和Zn²⁺0.002mol/L-0.004mol/L，余量 为水，pH=自然。

4.根据权利要求1所述利用固氮菌、解磷菌和解钾菌共同发酵制备生物有机肥的方 法，其特征在于，步骤3）中所述的发酵培养基按重量百分比计为：膨化鸡粪30%-50%、稻壳粉 30%-40%、花生壳粉15%-25%、葡萄糖0.1%-1%、玉米粉0.5%-2%。

5.根据权利要求1所述利用固氮菌、解磷菌和解钾菌共同发酵制备生物有机肥的方 法，其特征在于，一级菌种制备方法为：将配制好的培养基装入到500ml三角瓶中，每瓶装入 250ml，瓶口采用8层纱布和封口膜包扎；121℃下灭菌20min；灭菌后，分别单独接种固氮 菌、解磷菌或解钾菌试管菌种；置于恒温水浴振荡器中，30℃，120r/min，培养48h。

6.根据权利要求1所述的利用固氮菌、解磷菌和解钾菌共同发酵制备生物有机肥的 方法，其特征在于，二级菌种制备方法为：将配制好的培养基装入到500ml三角瓶中，每瓶装 入250ml，瓶口采用8层纱布和封口膜包扎；121℃下灭菌20min；灭菌后，按照5%的接种量分 别单独接种固氮菌、解磷菌或解钾菌的一级菌种；置于多层液体菌种摇床中，30℃，120r/ min，培养48h。

7.根据权利要求1所述利用固氮菌、解磷菌和解钾菌共同发酵制备生物有机肥的方 法，其特征在于，三级混合菌种制备方法为：将配制好的培养基装入到500ml三角瓶中，每瓶 装入250ml，瓶口采用8层纱布和封口膜包扎；121℃下灭菌20min；灭菌后，每瓶按培养基总 体积计接种固氮菌4%、解磷菌3%和解钾菌3%的二级菌种；置于多层液体菌种摇床中，30℃， 120r/min，培养48h。

8.根据权利要求1所述利用固氮菌、解磷菌和解钾菌共同发酵制备生物有机肥的方 法，其特征在于，步骤3）中所述将三级混合菌种接种于发酵培养基进行发酵培养是在每 1000千克发酵培养基中加入三级混合菌种10-30千克，调节发酵培养基含水量在45～55%之 间。

9.根据权利要求1所述利用固氮菌、解磷菌和解钾菌共同发酵制备生物有机肥的方 法，其特征在于，步骤4）中所述进行二次发酵是将发酵好的三级混合菌种接种于玉米秸秆、 畜禽粪便农业废弃物中后堆成大堆发酵，每三到四天翻堆一次，发酵15天。