[发明专利]一种在铜表面制备抗凝血氧化锌薄膜的方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种在铜表面制备抗凝血氧化锌薄膜的方法。

背景技术

生物材料是一类可用于动物器官和组织的修复与替换、疾病的诊断与治疗，与动物生物相容、具有特殊性能或功能的材料。抗凝血生物材料是生物材料的重要组成部分，被广泛应用于与人类血液和组织相接触的医用材料上，如血液透析系统、体外循环系统、人工心脏瓣膜、心脏起搏器、人工血管、血管支架、外科手术线和导管等。以冠状动脉和外围心血管疾病为主的动脉粥样硬化心血管疾病，是世界上死亡率最高的疾病之一。2010年，仅在美国，用于心血管疾病的费用就高达4485亿美元。抗凝血材料的市场非常庞大，并且以每年10%—20%的速率增长。因此研究氧化锌的抗凝血性有很大的意义。

发明内容

为了研究氧化锌薄膜表面的抗凝血性能，本发明提供了一种在铜片表面制备抗凝血氧化锌薄膜的方法。

本发明所采取的技术方案是：一种在铜片表面制备抗凝血氧化锌薄膜的方法，其特征在于：通过配制特定浓度的硝酸锌溶液，用稳压直流电源对打磨清洗过的铜片进行电沉积，制备种子层，将样品放入反应釜中，倒入等摩尔比的Zn(NO₃）₂·6H₂O和NH₃^.H₂O的混合溶液，在特定条件下反应一段时间后取出，进行煅烧，再测量其表面静态接触角，选取超疏水/超亲水的样品放入血小板溶液中离心，使血小板黏附在薄膜上，在扫描电镜下观察。

本发明的制备特征工艺步骤如下：

一、配制浓度为0.01 mol/L至0.05 mol/L的Zn(NO₃）₂·6H₂O溶液，将洗净的铜片固定在电极的一端，用2 V的直流电源在50℃至90℃的电沉积液中进行电沉积，沉积时间为10 min；

二、配置浓度为0.02 mol/L至0.08 mol/L的Zn(NO₃）₂·6H₂O溶液，往溶液中滴入等摩尔比的NH₃^.H₂O，充分搅拌均匀；

三、将有种子层的铜片放入反应釜中，再将步骤二配置好的溶液倒入反应釜中，然后把密封好的反应釜置入恒温箱中。在70℃至90℃的大气氛围中反应2 h至4 h；

四、取出反应釜待其降至室温后，将样品取出，用去离子水洗涤后放入马弗炉。将温度设置为200℃，保温时间为2 h；

五、取出样品待其冷却后用接触角测量仪测量纳米氧化锌表面的静态接触角；

六、取5 mL新鲜的人体血液，摇匀，离心（3650 r/min）10 min。吸取全部上清液至另一离心管，再次离心（3000 r/min）10 min。弃去上清液的3/4，剩余液体为高浓度血小板血浆；

七、取20 uL高浓度血小板血浆用PH=7.4的磷酸盐缓冲液稀释20倍，得到血小板溶液；

八、把样品浸泡在血小板溶液中, 然后以3500 r/min 转速离心1 min, 用磷酸盐缓冲液漂洗, 2.0%戊二醛固定1 h, 再由乙醇系列脱水、丙酮脱醇；

九、在扫描电镜下观察血小板形态、聚积、变形等情况, 对每个样品, 随机选取3个均匀分布的区域进行拍照。观察血小板的黏附数量和血小板的形态。

进一步的，所述步骤一中通过电沉积来制备种子层。

进一步的，所述步骤二中加入NH₃^.H₂O的量为溶液恰好由混浊转变为澄清。

进一步的，所述步骤四中反应釜冷却，用大量冷水快速降温，取出样品放在 200℃温度下，在空气中进行，不含有其他保护性气体。

进一步的，所述步骤五中制备出具有超亲水或超疏水的样品。

进一步的，所述步骤六中将血液离心获得高浓度血小板血浆。

进一步的，所述步骤八中血小板黏附在铜片上，保护好其微观形态。

进一步的，所述步骤九中观察血小板的形态，统计血小板的数量。