[发明专利]一种低血清培养猪肺炎支原体培养基及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种低血清培养猪肺炎支原体培养基，由基础培养基和辅助培养基组成，其中基础培养基包括MEM3-4g、酵母粉1-2g、葡萄糖3-4g、蛋白胨6-8g、0.5wt.%酚红溶液1-2mL、氯化钠1-2g、Na₂HPO₄·12H₂O0.5-1.0g、KH₂PO₄0.1-0.2g、去离子水400-600mL；辅助培养基包括酵母浸出汁30-60mL，20wt.%L-精氨酸溶液0.5-1mL，3wt.%谷氨酰胺溶液40-50mL，青霉素终浓度为100-300U/mL，灭活的猪血清40-100mL；其特征在于所述基础培养基还含有氯化钾0.1-0.5g；所述辅助培养基还含有0.01g/mL胆固醇甘油溶液5-10mL、10wt.%甘氨酸溶液0.5-1mL，10wt.%L-半胱氨酸溶液1-2mL；最后，将配置好的基础培养基和辅助培养基混合，并用1mol/L氢氧化钠溶液调整pH值至7.4-7.6。

2.根据权利要求1所述的一种低血清培养猪肺炎支原体培养基，其特征在于以整体计每400mL培养基中加灭活的猪血清不高于40mL，即整体培养基中血清添加的体积比例小于10%。

3.根据权利要求1所述的一种低血清培养猪肺炎支原体培养基，其特征在于所述0.01g/mL胆固醇甘油溶液的制备方法为：用0.1-0.5g胆固醇溶于10-50mL甘油内，并在116℃灭菌30min，冷却至37℃。

4.根据权利要求1~3任一所述低血清培养猪肺炎支原体培养基的制备方法，其特征在于按照下列步骤进行：

a、制备基础培养基：将基础培养基的所有成分，搅拌均匀混合，全部溶解，在116℃灭菌30min，待冷却后备用；

b、制备辅助培养基：将辅助培养基的成分过滤除菌，混合搅拌，既得辅助培养基；

c、将高压冷却灭菌好的基础培养基和辅助培养基混合，用过滤除菌的1mol/LNaOH调节pH值7.4-7.6，分装备用。

5.权利要求1~3任一所述培养基在培养猪肺炎支原体中的应用。