[发明专利]一种大鼠骨髓间充质干细胞向脂肪细胞诱导分化方法

权利要求书

1.一种大鼠骨髓间充质干细胞向脂肪细胞诱导分化方法，其特征在于，所述大鼠骨髓 间充质干细胞向脂肪细胞诱导分化方法包括：

步骤一、选择第3代骨髓间充质干细胞，按1×10⁶mL^-1浓度接种于细胞培养瓶内，待细胞 贴壁生长至细胞密度达80％时，加入不同浓度油酸作为诱导剂；

步骤二、以基础培养基DMEM添加体积比例为10％的胎牛血清，分别添加25mM、50mM、 100mM和200mM油酸四种浓度为成脂肪细胞的诱导培养基；

步骤三、每三天换液一次，以未加诱导培养液的细胞培养瓶作为对照，3周后油红0染色 检测。

2.如权利要求1所述的大鼠骨髓间充质干细胞向脂肪细胞诱导分化方法，其特征在于， 步骤二中以基础培养基DMEM添加体积比例为10％的胎牛血清，具体为45mlDMEM培养基加入 5ml胎牛血清。

3.如权利要求1所述的大鼠骨髓间充质干细胞向脂肪细胞诱导分化方法，其特征在于， 步骤二中分别添加25mM、50mM、100mM和200mM油酸量为：

25mM油酸50ul40mM油酸母液+40ml完全培养基

50mM油酸100ul40mM油酸母液+40ml完全培养基

100mM油酸200ul40mM油酸母液+40ml完全培养基

200mM油酸400ul40mM油酸母液+40ml完全培养基。

4.如权利要求2所述的大鼠骨髓间充质干细胞向脂肪细胞诱导分化方法，其特征在于， 40mM油酸母液制备方法为：取38.08ul油酸加入3ml0.1mol/LNaOH溶液中，置于75度水浴进 行充分皂化约30min，最终至无色透明澄清，将保温的油酸溶液迅速的加入3ml40％BSA溶 液，混匀后过滤备用，-20℃保存；茜素红(AlizarinRedS)染色试剂：50mlPBS中加入50mg 茜素红配成1mg/ml溶液，过滤，调pH至4.2。