[发明专利]一种耐温，酸稳定的内切多聚半乳糖醛酸酶基因的克隆、定义及应用在审
| 申请号： | 201610259542.X | 申请日： | 2016-04-25 |
| 公开（公告）号： | CN105779419A | 公开（公告）日： | 2016-07-20 |
| 发明（设计）人： | 程忠;陈东;卢波;陆琦;黎贞崇;王青艳;黄日波 | 申请（专利权）人： | 广西科学院 |
| 主分类号： | C12N9/24 | 分类号： | C12N9/24;C12N15/56;C12N15/81;C12N1/19;C12P19/14 |
| 代理公司： | 广西南宁公平专利事务所有限责任公司 45104 | 代理人： | 韦锦捷 |
| 地址： | 530007 广西壮*** | 国省代码： | 广西;45 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 耐温 稳定 内切多聚 半乳糖 醛酸 基因 克隆 定义 应用 | ||
1.一种耐温，酸稳定的内切多聚半乳糖醛酸酶rEPG4，其特征在于，其氨基酸序列如 SEQIDNO.1、SEQIDNO.2或SEQIDNO.3所示。
2.一种克隆了权利要求1所述的内切多聚半乳糖醛酸酶rEPG4的基因epg4，其特征在于， 其核苷酸序列如SEQIDNO.4、SEQIDNO.5或SEQIDNO.6所示。
3.包含权利要求2所述DNA分子的克隆载体、表达载体、重组大肠杆菌或重组毕赤酵母。
4.根据权利要求3所述的表达载体，其特征在于，所述的表达载体为在巴氏毕赤酵母 Pichiapastoris中表达的pPIC9K载体，具体为在pPIC9K载体的SnaBI和AvrII酶切位点间插入 序列表中SEQIDNO.6核苷酸得到的表达载体pPIC9K-repg4。
5.根据权利要求3所述的重组毕赤酵母，其特征在于，所述的重组毕赤酵母为将所述表 达载体pPIC9K-repg4导入巴斯德毕赤酵母中得到的重组菌GS115/rEPG4。
6.权利要求2所述的DNA分子或权利要求3所述的克隆载体、表达载体、重组大肠杆菌、 及重组毕赤酵母在制备内切多聚半乳糖醛酸酶rEPG4中的应用。
7.权利要求1所述的内切多聚半乳糖醛酸酶rEPG4的制备方法，其特征在于，包括以下步 骤：
1)用pPIC9K-repg4重组载体转化巴斯德毕赤酵母PichiapastorisGS115，筛选得到重组 菌株GS115/rEPG4；
2)培养重组菌株，甲醇诱导重组内切多聚半乳糖醛酸酶基因epg4的表达；
3)回收并纯化所生产的内切多聚半乳糖醛酸酶rEPG4。
8.权利要求1所述的内切多聚半乳糖醛酸酶rEPG4在降解聚半乳糖醛酸或果胶中的应用。
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