[发明专利]一种复合发酵秸秆降解剂、制备方法及应用

权利要求书

1.一种复合发酵秸秆降解剂，其特征在于：所述秸秆降解剂是里氏木霉与哈茨木霉分别经物理诱变后对峙培养所得的复合菌物。

2.一种权利要求1所述的复合发酵秸秆降解剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)从市场购买或自然界分离筛选出野生里氏木霉与哈茨木霉；

(2)用N⁺或Ar⁺或CO₂⁺对里氏木霉和哈茨木霉分别进行离子束的注入，并与对照组比较，分离筛选出里氏木霉突变株和哈茨木霉突变株；

(3)将里氏木霉突变株和哈茨木霉突变株分别在PDA培养基上培养，筛选出发亮、生长旺盛的菌落，然后将里氏木霉突变株接种到纤维素筛选培养基、哈茨木霉突变株接种到几丁质筛选培养基上，筛选纯化出高活力菌株；

(4)将筛选出的高活力里氏木霉突变株和哈茨木霉突变株点在同一平板上对峙培养，用于使两种突变株互相补充对方营养物、相互促进对方生长；重复三次，混合扩大培养，测定其功能性酶活性。

3.根据权利要求2所述的一种复合发酵秸秆降解剂的制备方法，其特征在于：步骤(2)所述离子束的注入剂量为10kev。

4.根据权利要求2所述的一种复合发酵秸秆降解剂的制备方法，其特征在于：步骤(3)所述PDA培养基由以下物质按重量百分比浓度配制：马铃薯2～3％；鱼蛋白粉0.5～3.3％；FeSO₄0.01～0.03％；KH₂PO₄0.02～0.20％；MgSO₄0.05～0.35％；Na₂B₂O₇·10H₂O0.025～0.05％；Na₂SeO₃0.025～0.05％；ZnSO₄0.01～0.02％；余量为水。

5.一种权利要求1所述复合发酵秸秆降解剂的应用，其特征在于：根据不同农作物品种，配制固体发酵培养基，加入待降解秸秆，接种复合发酵秸秆降解剂进行发酵培养。

6.根据权利要求5所述的一种复合发酵秸秆降解剂的应用，其特征在于：所述固体发酵培养基中包括发酵基料、缓冲液、含氮化合物和Tween-20，且干物质的重量占总量的30～50％。

7.根据权利要求5所述的一种复合发酵秸秆降解剂的应用，其特征在于：所述复合发酵秸秆降解剂的接种量为0.5×10⁸～1.5×10⁸个/mL。

8.根据权利要求5所述的一种复合发酵秸秆降解剂的应用，其特征在于，所述发酵培养的条件为：pH6～7，温度27～29℃，压力0.05～0.1MPa，发酵10～13天。