[发明专利]一种人参叶中人参皂苷Rg1和Re的测定方法

说明书

技术领域

本发明涉及实验室检测领域，特别是一种人参叶中人参皂苷Rg1和Re的测定方法。

背景技术

2015年药典记载：取本品粉末约0.2g，精密称定，置索氏提取器中，加三氯甲烷30ml， 加热回流1小时，弃去三氯甲烷液，药渣挥去三氯甲烷，加甲醇30ml，加热回流3小时，提 取液低温蒸干，加水10ml使溶解，加石油醚(30～60℃)提取2次，每次10ml，弃去醚液，水 液通过D101型大孔吸附树脂柱(内径为1.5cm，柱长为15cm)，以水50ml洗脱，弃去水液。 再用20％乙醇50ml洗脱，弃去20％乙醇洗脱液，继用80％乙醇80ml洗脱，收集洗脱液70ml， 蒸干，残渣加甲醇溶解，转移至10ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。 LC测试的条件为：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-0.05％磷酸溶液(20：80)为 流动相；检测波长为203nm。理论板数按人参皂苷Re峰计算应不低于1500。

药典的方法操作过程复杂，洗脱次数多，对操作人员的操作技能要求高。

发明内容

本发明的目的是提供一种人参叶中人参皂苷Rg1和Re的测定方法，该方法操作简单， 测定精度高。

本发明提供的技术方案为：一种人参叶中人参皂苷Rg1和Re的测定方法，其特征在于， 包括以下步骤：

步骤1：将人参叶粉碎后采用ASE萃取法得到萃取液；

步骤2：将萃取液在石墨碳SPE柱存在的条件下离心，对离心后的液体过滤得到滤液；

步骤3：将滤液采用液相色谱法分析；

液相色谱分析条件为：

a)仪器：双三元液相色谱仪

b)色谱柱：50×2.1mm1.7μm

c)柱温：40℃

d)流速：0.3mL/min

e)流动相：乙腈-水；梯度洗脱；

其中梯度洗脱具体为在0-1min时流动相为乙腈：水，其体积比为60:40；1-3min时流动 相为乙腈：水，其体积比为70:30；3-8min时流动相为乙腈：水，其体积比为80:20；

f)检测波长：203nm。

在上述的人参叶中人参皂苷Rg1和Re的测定方法中，所述的步骤1具体为：

S11：将人参叶粉碎后，过筛；

S12：称取0.2重量份罗汉果粉，与1重量份硅藻土混合均匀待用；

S13：在预先放好过滤膜的萃取池中加入步骤2所得到的混合物，加入适量的硅藻土至达 到萃取池的池口；盖上萃取池的盖子进行静态萃取；萃取结束后得到萃取液；

萃取条件为：萃取溶剂为甲醇；萃取温度110℃；静态萃取时间7min；冲洗体积80％； 静态循环次数3次。

在上述的人参叶中人参皂苷Rg1和Re的测定方法中，所述的萃取池的体积为10ml。

在上述的人参叶中人参皂苷Rg1和Re的测定方法中，所述的静态萃取的压力为1500psi。

在上述的人参叶中人参皂苷Rg1和Re的测定方法中，所述的静态萃取的吹扫时间为60s。

在上述的人参叶中人参皂苷Rg1和Re的测定方法中，所述的步骤2具体为将萃取液稀 释后加入到离心管中净化，然后过滤后得到滤液，所述的离心管中加有石墨碳SPE柱。

在上述的人参叶中人参皂苷Rg1和Re的测定方法中，所述的双三元液相色谱仪为Thermo U3000UHPLC液相色谱仪。

在上述的人参叶中人参皂苷Rg1和Re的测定方法中，所述的色谱柱为ThermoSyncronis Dim.(mm)AQ色谱柱。

在上述的人参叶中人参皂苷Rg1和Re的测定方法中，所述的ASE萃取法采用的是 ASE350快速溶剂萃取仪。

本发明在采用上述技术方案后，其具有的有益效果为：

本发明的萃取方法操作简单，精度与药典方法的精度一致，重复性好。

附图说明

图1为本发明的色谱分析人参皂苷Rg1有效性验证的直角坐标图；

图2为本发明的色谱分析人参皂苷Re有效性验证的直角坐标图。

具体实施方式

下面结合具体实施方式，对本发明的技术方案作进一步的详细说明，但不构成对本发明 的任何限制。

实施例1：