[发明专利]一种双重适配体修饰的靶向给药系统及其制备方法

权利要求书

1.一种靶向给药系统，由聚乙二醇、肽适配体DUP-1、RNA适配体A10-3.2、含PTEN的重组腺病毒Ad5和抗肿瘤药物组成，其中，所述聚乙二醇为两端用羧 基封端的聚乙二醇，其特征在于，采用两端用羧 基封端的聚乙二醇为连接臂，将RNA适配体A10-3.2和肽适配体DUP-1，通过化学步骤连接到含有抑癌基因PTEN的重组腺病毒Ad5表面，然后将阿霉素以嵌入作用方式与RNA双链适配体A10-3.2结合得到。

2.根据权利要求1所述的靶向给药系统，其特征在于所述RNA适配体A10-3.2与抗肿瘤药物的摩尔浓度比为2:1。

3.根据权利要求1所述的靶向给药系统，其特征在于，所述肽适配体DUP-1的氨基酸序列为：FRPNRAQDYNTN，所述RNA适配体A10-3.2的序列为：5'-GGGAGGACGAUGCGGAUCAGCCAUGUUUACGUCACUCCU-3'。

4.根据权利要求1所述的靶向给药系统，其特征在于，所述抗肿瘤药物为盐酸阿霉素。

5.根据权利要求1所述的靶向给药系统，其特征是所述的聚乙二醇的重均分子量为400-8000。

6.根据权利要求5所述的靶向给药系统，其特征是所述的聚乙二醇的重均分子量为2000-5000。

7.权利要求1所述的靶向给药系统在制备靶向治疗前列腺癌药物中的用途。

8.权利要求1所述的靶向给药系统的制备方法，其具体步骤如下：

第一步：首先取一定量的聚乙二醇溶液，然后再加入N-羟基丁二酰亚胺和碳二亚胺盐酸盐，用MES缓冲液调节pH至6.0，在室温下搅拌1h，以随机活化聚乙二醇中的羧基，然后加入腺病毒原液，于37℃搅拌反应2h，搅拌速度为300r/min，制备得到PEG-Ad5；

第二步：取精制得到的PEG-Ad5，加入N-羟基丁二酰亚胺溶液和碳二亚胺盐酸盐溶液，用MES缓冲液调节pH至6.0，在室温下轻柔搅拌，孵育1h，以活化精制PEG-Ad5中另一个未反应的羧基，然后向反应液中加入DUP-1适配体溶液，于37℃搅拌避光反应2h，搅拌速度为300r/min，制备得到DUP-1-PEG-Ad5；

第三步：取精制得到的DUP-1-PEG-Ad5，加入N-羟基丁二酰亚胺溶液和碳二亚胺盐酸盐溶液，用MES缓冲液调节pH至6.0，在室温下轻柔搅拌，孵育1h，以活化精制DUP-1-PEG-Ad5中其余未反应的羧基，然后用MES缓冲液调节反应液pH至7.0，加入A10-3.2适配体溶液，于37℃搅拌避光反应2h，搅拌速度为300r/min，制备得到A10-3.2/DUP-1-PEG-Ad5，最后用分子截留量为100KD的超滤离心管进行超滤离心，洗涤后得到精制的A10-3.2/DUP-1-PEG-Ad5；

第四步：将精制的A10-3.2/DUP-1-PEG-Ad5反应液稀释，根据DOX能嵌入到双链RNA适配体A10-3.2中的最大量，于反应液中加入一定量的DOX，再加入一定量的无水DMSO，于室温下搅拌避光反应48h，然后经过超滤离心、洗涤后，得到目标给药系统。