[发明专利]人工合成的Streptomyces hirsutus ATCC 19091蛋白编码基因及其应用有效
申请号: | 201610200584.6 | 申请日: | 2016-03-31 |
公开(公告)号: | CN107287215B | 公开(公告)日: | 2021-06-29 |
发明(设计)人: | 丁雪峰 | 申请(专利权)人: | 南京诺云生物科技有限公司 |
主分类号: | C12N15/31 | 分类号: | C12N15/31;C12N15/70;C12N1/21;C12P17/12 |
代理公司: | 南京众联专利代理有限公司 32206 | 代理人: | 张慧清 |
地址: | 210000 江苏*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 人工合成 streptomyces hirsutus atcc 19091 蛋白 编码 基因 及其 | ||
1.DNA分子,为核苷酸序列如序列表中的序列3所示的DNA分子;所述DNA分子的制备方法:利用Primer Premier和OPTIMIZER进行设计,并保证Tm差异控制在3℃以内,引物长度控制在50base以内;按照设计好的引物合成,得到目标引物后,将获得的引物加双蒸水溶解后,加到如下的反应体系中,使得各引物的终浓度为30nM,首尾引物的终浓度为0.6μM;将配制好的PCR反应体系置于博日XP cycler基因扩增仪中,按下列程序进行扩增:98℃30s,65℃45s,72℃120s,35x;将PCR得到的DNA片段进行切胶纯化,利用同源重组的方法克隆进pET30a的NdeI/XhoI位点。
2.含有权利要求1中所述DNA分子的重组载体。
3.含有权利要求1中所述DNA分子的大肠杆菌。
4.权利要求3所述的大肠杆菌作为制备L-2-哌啶甲酸全细胞催化剂的应用。
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