[发明专利]用于检测血清中MGMT抗体的多肽，检测器件和检测试剂盒

说明书

技术领域

本发明属于生物检测领域，主要涉及用于检测血清中MGMT抗体的多肽，检测器件和检测试剂盒。

背景技术

胶质母细胞瘤(GlioblastomamultiformeGBM)是最具侵袭性的人脑高度恶性肿瘤，临床诊断后的患者平均生存期12～15月，因此一直是临床治疗的难点。临床治疗中，抗肿瘤药物因为获得性耐药、高毒性、血脑屏障(bloodbrainbarrierBBB)和肿瘤内和肿瘤周围又存在一定数量耐药的胶质瘤干细胞(gliomastemcellsGSCs)等诸多原因，最终导致化疗失败。尽管到目前为止，二代烷化剂-替莫唑胺(TemozolomideTMZ)能有效透过BBB，而且毒副作用小，国际标准化的Stupp化疗方案被认为是目前最好的临床治疗胶质母细胞瘤的化疗方案，一部分GBM患者生存期从此获益。但遗憾的是，即使应用了上述手术、放疗和化疗的综合治疗，胶质母细胞瘤的平均生存期仍然只有14.6月，5年生存率只有9.8％。大家公认，导致TMZ标准化疗失败的根本原因是肿瘤中存在耐药的胶质瘤细胞和胶质瘤细胞，这些耐药细胞的O⁶-甲基鸟嘌呤DNA甲基转移酶(O⁶-methylguanineDNAmethyltransferase，MGMT)在细胞耐药性上起着关键的作用。

MGMT是一种高效的DNA修复酶，能够修复化疗中烷化剂药物对肿瘤细胞DNA所造成的损伤。研究结果表明，当MGMT在胶质母细胞瘤组织中高表达，肿瘤细胞对烷化剂就出现耐药；或其MGMT发生甲基化，肿瘤细胞表现为对TMZ的敏感性。目前临床把肿瘤组织中MGMT的表达和MGMT的甲基化作为判断新发GBM对TMZ治疗敏感性的指标。因此，必须采集到GBM的组织，进行MGMT甲基化分析，以及应用免疫组织化学和Western-blot对组织中MGMT蛋白表达。但临床实际中存在二种情况，一是无法获得肿瘤组织或只有少量组织，无法获取完整的耐药性信息；二是部分GBM会TMZ治疗中出现继发性耐药。在基础研究中发现GBM细胞株可在TMZ培养下成功地培育出耐TMZ的细胞株，并高效表达MGMT，这也是模拟了临床实际治疗中部分患者出现的继发性耐药。正如临床抗菌素治疗细菌感染中，出现耐药的细菌株，导致抗菌素治疗的失败。

因此，胶质母细胞瘤治疗的临床实践中，迫切需要开发一种GBM的伴侣MGMT检测试剂盒产品，通过监测患者血清的方法来明确肿瘤对TMZ的耐药性，既解决了肿瘤组织无或不足所导致的临床使用TMZ的盲目性，又解决了肿瘤治疗过程中判断可能出现的获得性耐药的问题。

发明内容

本发明的目的在于提供一种用于检测血清中MGMT抗体的多肽、抗该多肽的抗体、包含该多肽的检测器件、包含该多肽或该检测器件的检测试剂盒、以及该多肽在检测血清中MGMT抗体中的用途、该多肽在制备用于检测血清中MGMT抗体的检测器件或检测试剂盒中的用途。

即，本发明包含下述技术方案：

1.一种用于检测血清MGMT抗体的多肽，其氨基酸序列如SEQIDNO：1所示，即：TLDSPLGKLELSGCEQGLHE。

2.编码权利要求1所述的多肽的核酸。

3.包含权利要求2所述的核酸的表达载体。

4.导入权利要求3所述的表达载体的宿主细胞。

5.抗权利要求1所述的多肽的抗体。

6.一种检测器件，其包括：

固体载体，以及

连接于该固体载体上的权利要求1所述的多肽。

7.根据权利要求2所述的检测器件，其中，所述固体载体是IPDMS薄膜。

8.一种检测试剂盒，其包括权利要求1所述的多肽、或者权利要求2或3所述的检测器件。

9.权利要求1所述的多肽在制备用于检测血清中MGMT抗体的试剂盒或检测器件中的用途。

将本发明的多肽应用与检测血清中MGMT抗体，具有高度特异性和灵敏性，可对TMZ产生耐药性提供实验室判定依据，从而用于指导临床化疗用药。本发明的多肽可应用于检测血清中MGMT抗体的检测器件或检测试剂盒。

附图说明

图1对IPDMS薄膜的制作过程进行说明的示意图。

图2说明多肽微阵列点样模式的示意图。

图3是显示对健康正常人或非胶质母细胞瘤病人血清进行检测的结果的照片。

图4是显示对胶质母细胞瘤病人血清进行检测的结果的照片。

具体实施方式