[发明专利]一种用于内耳毛细胞定向转染的纳米基因载体复合物及其制备方法在审
| 申请号： | 201610182762.7 | 申请日： | 2016-03-28 |
| 公开（公告）号： | CN107236760A | 公开（公告）日： | 2017-10-10 |
| 发明（设计）人： | 吴南;杨仕明;王方园;邓雄威;吴雁;陈志婷 | 申请（专利权）人： | 中国人民解放军总医院 |
| 主分类号： | C12N15/85 | 分类号： | C12N15/85;A61K48/00;A61P27/16 |
| 代理公司： | 北京方安思达知识产权代理有限公司11472 | 代理人： | 王宇杨,陈琳琳 |
| 地址： | 100853*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 用于 内耳 细胞 定向 转染 纳米 基因 载体 复合物 及其 制备 方法 | ||
1.一种用于内耳毛细胞定向转染的纳米基因载体复合物，其特征在于，所述纳米基因载体复合物包括由透明质酸修饰的PEI载体以及由所述载体运载的Atoh1基因。
2.根据权利要求1所述的纳米基因载体复合物，其特征在于，所述PEI载体为25kDa的bPEI纳米颗粒。
3.根据权利要求1所述的纳米基因载体复合物，其特征在于，所述Atoh1基因为小鼠来源。
4.一种权利要求1-3任一所述纳米基因载体复合物的制备方法，包括以下步骤：
1)纳米基因载体复合物的制备：将Atoh1质粒及PEI纳米颗粒混溶于无酶去离子水中，获得PEI/Atoh1复合物；
2)纳米基因复合物的修饰：将PEI/Atoh1复合物加入透明质酸溶液中，反应后即获得纳米基因复合物。
5.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于，步骤1)按照N/P＝10:1将Atoh1质粒及PEI纳米颗粒混溶于无酶去离子水中，保持溶液pH＝7.2-7.6。
6.根据权利要求4或5所述的制备方法，其特征在于，步骤2)按照COOH/N/P＝4:10:1将PEI/Atoh1复合物加入透明质酸溶液中。
7.根据权利要求4-6任一所述的制备方法，其特征在于，步骤1)将Atoh1质粒及PEI纳米颗粒混溶于无酶去离子水后，反复吹打20-30次，室温下反应20-30分钟。
8.根据权利要求4-6任一所述的制备方法，其特征在于，步骤2)将PEI/Atoh1复合物加入透明质酸溶液后，反复吹打20-30次，室温下反应20-30分钟。
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