[发明专利]信号识别粒子亚基及其编码基因在制耐酸性双歧杆菌中的应用及含该基因的质粒和双歧杆菌

说明书

本发明涉及生物工程领域，具体公开了SEQ ID No：1所示的信号识别粒子亚基和/或编码该信号识别粒子亚基的核苷酸序列在制备耐酸性双歧杆菌中的应用，还公开了含有如上所述的核苷酸序列的重组表达质粒以及含有如上所述的信号识别粒子亚基和/或编码该信号识别粒子亚基的核苷酸序列和/或所述重组表达质粒的耐酸性双歧杆菌。通过上述技术方案，将编码SEQ ID No：1所示的信号识别粒子亚基的基因，优选为含有该基因的质粒P18P转化到双歧杆菌，优选为双歧杆菌CGMCCNo.2265中，能够耐受pH低至1、优选低至2、更优选低至3.5的酸度。

技术领域

本发明涉及基因工程领域，具体涉及SEQ ID No：1所示的信号识别粒子亚基和/或编码该信号识别粒子亚基的核苷酸序列在制备耐酸性双歧杆菌中的应用，以及含有所述核苷酸序列的重组表达质粒和耐酸性双歧杆菌。

背景技术

双歧杆菌是肠内最为有益的菌群，适宜生长pH值为6.5-7.5，双歧杆菌数量的减少乃至消失是“不健康”状态的标志，双歧杆菌是人体健康的晴雨表。补充双歧杆菌的主要途径是喝含双歧杆菌的酸奶或饮料，也可直接喝双歧杆菌的微生态制剂(菌粉或1：3服液)。

而公知人体胃液的酸度一般为0.9-1.5，正常情况下，双歧杆菌经过胃液的强酸性环境后的存活率会大大下降。目前针对双歧杆菌的耐酸性研究主要集中在对其进行包被、耐酸性驯化等等。但进行包被处理操作繁琐，并且加入包被菌株的酸奶或乳酸饮料口感会变差，而经耐酸性驯化的双歧杆菌的遗传特性也较为不稳定。

因此，开发一种稳定的耐较强酸度的双歧杆菌一直是研发的热点。

发明内容

本发明的目的是为了克服以上缺陷，提供了一种稳定的且具有较强耐酸性的双歧杆菌。

为了实现上述目的，一方面，本发明提供一种SEQ ID No：1所示的信号识别粒子亚基和/或编码该信号识别粒子亚基的核苷酸序列在制备耐酸性双歧杆菌中的应用。

第二方面，本发明还提供了含有编码SEQ ID No：1所示的信号识别粒子亚基的核苷酸序列的重组表达质粒。

第三方面，本发明还提供了含有SEQ ID No：1所示的信号识别粒子亚基和/或编码SEQ ID No：1所示的信号识别粒子亚基的核苷酸序列和/或如上所述的重组表达质粒的耐酸性双歧杆菌。

通过上述技术方案，将编码SEQ ID No：1所示的信号识别粒子亚基的基因，优选为含有该基因的质粒P₁₈P转化到双歧杆菌，优选为双歧杆菌CGMCC No.2265中，能够耐受pH低至1、优选低至2、更优选低至3.5的酸度。

本发明的其它特征和优点将在随后的具体实施方式部分予以详细说明。

附图说明

附图是用来提供对本发明的进一步理解，并且构成说明书的一部分，与下面的具体实施方式一起用于解释本发明，但并不构成对本发明的限制。在附图中：

图1A为Ffh全长阅读框EcoRI+C-ffh-BamHI的琼脂糖电泳图。

图1B为P₁₈P和P₁₈P-Ffh的琼脂糖电泳图。

图1C为P₁₈P穿梭表达载体的构建示意图。

图2为转化有P₁₈P-Ffh大肠杆菌DH5α表达目的基因Ffh情况的SDS-PAGE电泳图。

图3为显示CGMCC No.2265中pDG-7质粒的表达情况的琼脂糖电泳图。

图4显示了CGMCC No.2265中pDG-7质粒中氯霉素抗性基因Cmr的表达情况。