[发明专利]豆粉中串珠镰刀菌定性标准样品及其制备方法

说明书

本发明属于生物技术领域，特别涉及一种豆粉中串珠镰刀菌定性标准样品及其制备方法。本发明根据串珠镰刀菌具有分类学意义的技术指标，解决了串珠镰刀菌实物标准样品溯源参照系与参照指标问题，并应用于本标准样品的定值分析中，在标准样品定性测试理论的研究成果基础上，在国家生物安全标准样品体系框架下，以来源明确的产毒真菌串珠镰刀菌模拟自然污染豆粉样品，采集对数生长期的串珠镰刀菌ACCC36127孢子污染无菌豆粉，混合仪拍打混合，分装，冻干制备出一种生物及产毒信息完整的串珠镰刀菌实物标准样品，获得具有真正溯源意义的串珠镰刀菌实物标准样品，是国内首次分类定级标准样品的研制，具有重要的意义。

技术领域

本发明属于生物技术领域，特别涉及一种豆粉中串珠镰刀菌定性标准样品及其制备方法。

背景技术

世界粮农组织（FAO）报告，全球每年约有25％的农作物遭受真菌及其真菌毒素污染，约有2％的农作物因污染严重而失去营养价值和经济价值，由此估算，全球每年因真菌毒素污染而造成的直接及间接损失将可能达到数百亿美元。

在目前已知的真菌毒素中，串珠镰刀菌(Fusarium moniliforme)是一种重要的植物病原菌, 危害小麦、玉米、水稻、蔬菜等农作物,造成严重的减产,所产生的真菌毒素玉米赤霉烯酮具有较强的生殖毒性和致崎作用。目前针对真菌毒素的检测，我国主要为理化方法，只能检测到已经产生的毒素，对于已被污染但尚未产生毒素的高风险食品却束手无策，更无法溯源，而且由于真菌的形态相似性及产毒真菌的产毒状况的复杂性，目前各菌种保藏中心提供的标准菌株基本信息不全，基本不涵盖产毒信息，使检验工作难以获得真正的阳性标准样品。

另一方面，目前已研制的分类定级国家标准样品多数溯源至相应的文字标准，生物类定性标准样品多数溯源至公认的测试方法，部分国家标准样品没有溯源性的描述。对2010年～2015年批准的146项分类定级国家标准样品溯源性描述的调查表明：无溯源性描述内容的35项，溯源至测试方法标准的102项，溯源至核酸序列的22项，溯源至产品标准的5项，溯源至计量基准的1项，溯源至权威专家的1项。分类定级国家标准样品溯源性描述的状况说明人们对这类标准样品的溯源性认识和理解上处于比较混乱的阶段，还没有一个统一的规范。

发明内容

本发明的目的是克服上述不足问题，提供一种豆粉中生物和产毒信息明确的串珠镰刀菌实物定性标准样品，同时采用标准物质分类定级理论，建立对豆粉中串珠镰刀菌实物定性标准样品的定值溯源参照系与参照指标。本发明的另一目的是提供一种豆粉中串珠镰刀菌定性标准样品的制备方法。

本发明为实现上述目的所采用的技术方案是：一种豆粉中串珠镰刀菌定性标准样品，其特征在于：所述豆粉中串珠镰刀菌定性标准样品包含的序列为：

内转录间隔区基因（ITS）序列：TCCGTAGGTGAACCTGCGGAGGGATCATTACCGAGTTTACTCCCAAACCCCTGTGAACATACCAATTGTTGCCTCGGCGGATCAGCCCGCTCCCGGTAAAACGGGACGGCCCGCCAGAGGACCCCTAAACTCTGTTTCTATATGTAACTTCTGAGTAAAACCATAAATAAATCAAAACTTTCAACAACGGATCTCTTGGTTCTGGCATCGATGAAGAACGCAGCAAAATGCGATAAGTAATGTGAATTGCAGAATTCAGTGAATCATCGAATCTTTGAACGCACATTGCGCCCGCCAGTATTCTGGCGGGCATGCCTGTTCGAGCGTCATTTCAACCCTCAAGCCCCCGGGTTTGGTGTTGGGGATCGGCGAGCCCTTGCGGCAAGCCGGCCCCGAAATCTAGTGGCGGTCTCGCTGCAGCTTCCATTGCGTAGTAGTAAAACCCTCGCAACTGGTACGCGGCGCGGCCAAGCCGTTAAACCCCCAACTTCTGAATGTTGACCTCGGATCAGGTAGGAATACCCGCTGAACTTAAGCATATCAATAAGCGGAGGA；