[发明专利]蛋白AqpSS9作为水通道蛋白的应用及利用无细胞蛋白合成体系合成并纯化活性蛋白AqpSS9的方法

权利要求书

1.蛋白AqpSS9作为水通道蛋白的应用，蛋白AqpSS9的氨基酸序列如SEQIDNO：1所示。

2.如权利要求1所述的应用，其特征在于所述作为水通道蛋白的应用为用于制备仿生膜。

3.如权利要求2所述的应用，其特征在于所获得的水通道蛋白制备仿生膜具有透水性，当仿生膜的水通道蛋白AqpSS9与磷脂的质量比为0时水通量为0.4L·m^-2·h^-1，当仿生膜的水通道蛋白AqpSS9与磷脂的质量比提高到1/200时水通量上升到2.2L·m^-2·h^-1，当仿生膜的水通道蛋白AqpSS9与磷脂的质量比提高到1/50时水通量上升到2.7L·m^-2·h^-1。所述磷脂由75%的1,2-二油酰基磷脂酰胆碱和25%的（2,3-二油酰基-丙基)-三甲胺构成。

4.如权利要求1所述的应用，其特征在于编码所述氨基酸序列的核苷酸序列如SEQIDNO：2所示。

5.如权利要求1所述的应用，其特征在于，蛋白AqpSS9具有透水的功能，空脂质体的水通透因子P_f值为89.3±1.8μm/s，嵌有AqpSS9的脂蛋白体的P_f值为310.7±3.2μm/s，AqpSS9的单体水通透因子P_f,mono为1.24×10^-20m³/s。

6.含权利要求4核苷酸序列的一种表达载体pIVEX-2.4c-AqpSS9，所述表达质粒pIVEX-2.4c-AqpSS9是利用PCR扩增出AqpSS9基因并克隆到pIVEX-2.4c质粒上构建的。

7.一种利用无细胞蛋白合成体系合成并纯化活性蛋白AqpSS9的方法，其特征在于，其无细胞蛋白合成体系具有如下特征，在无细胞蛋白的合成体系中添加去污剂Brij-78至0.7%，并加入权利要求6所述表达载体pIVEX-2.4c-AqpSS9至10μg/ml，37^oC，400rpm反应4h后可溶性的AqpSS9的产量达到565mg/L。