[发明专利]以奎宁-叔丁基氨基甲酸酯为手性选择子制备的手性固定相及其制备方法和应用

说明书

技术领域

本发明涉及手性分离技术，具体涉及以奎宁-叔丁基氨基甲酸酯为手性选择子制备的手性 固定相及其制备方法和应用。

背景技术

具有手性的化合物指的是具有实物与镜像不能完全重叠性质的化合物，含手性药物、手 性农药、手性有机合成中间体、手性环境污染物等。含有一个手性中心的化合物具有一对对 映体，这一对对映体的等量混合物构成一个外消旋体。手性药物通常以外消旋体的形式用药。 手性药物的一对对映体在人体内具有不同的代谢行为和生理效果，通常一个异构体具有良好 的疗效(优异构体)，另一个无效甚至具有强烈的副作用、毒性(致癌、致畸性)等作用(劣 异构体)。所以对于手性药物应该将对映体拆分开后深入研究每一个异构体的性质，并且以手 性纯的优异构体用药。

在众多的手性分离方法中，高效液相色谱(HighPerformanceLiquidChromatography， HPLC)手性固定相法是应用最广泛、最成功的手性色谱技术。适用于HPLC的手性固定相 (ChiralStationaryPhase，CSP)种类繁多，同时有大量商品化来源。适用于HPLC的手性 固定相通常是将手性选择子涂覆或键合到3-10微米粒径球形硅胶的表面来制备的，装填的不 锈钢色谱柱内径通常为4.6-10mm，长度为15-25cm，分离时间从数分钟到数十分钟。没有 任何一种CSP可以满足实际研究工作中所有对映体分离的需要，迫切需要开发新的具有高分 离性能的CSP。

超高压液相色谱即超高效液相色谱(UltraHighPerformanceLiquidChromatography， UHPLC)是现代液相色谱分离分析科技的最新进展。UHPLC通过减少固定相填料的粒径(至)、 较小内径色谱柱(通常为2.1mm内径)、较短色谱柱长度(5cm或10cm长)、高流速(最 高5ml/min)来获得更高的柱效和缩短分析时间。UHPLC色谱柱需要超高的压力(最高至1300 bar)来驱动流动相。目前商品化来源的UHPLC色谱柱只有C18、未键合SiO₂等非手性柱。

发明内容

为了解决现有技术的不足，本发明提供了以奎宁-叔丁基氨基甲酸酯为手性选择子制备的 手性固定相及其制备方法和应用。

本发明的技术方案是：以奎宁-叔丁基氨基甲酸酯为手性选择子制备手性固定相的方 法，依次包括以下步骤：步骤一，制备巯丙基衍生化全多孔球形硅胶；步骤二，将奎宁-叔丁 基氨基甲酸酯手性选择子键合到巯丙基衍生化全多孔球形硅胶制备手性固定相。

本发明的进一步改进包括：

所述步骤一具体包括：精确称取5.0g直径为1.1-1.9微米的全多孔球形硅胶，加入到 100ml的圆底烧瓶中，再加入60ml无水甲苯，安装分水器和氮气保护装置，磁力搅拌， 回流共沸除水3小时；将反应装置冷却至室温，移除分水器，加入10ml衍生化试剂3-巯丙 基三乙氧基硅烷，安装氮气保护装置，磁力搅拌，回流反应72小时；后处理：离心洗涤产物， 依次使用无水甲苯、甲醇、乙醚、正己烷各60ml洗涤，每步离心转速为5000rpm，离心 时间为10min；最后产物在60℃条件下真空干燥24小时。

所述步骤二具体包括：在100ml圆底烧瓶中，加入0.27g奎宁-叔丁基氨基甲酸酯手 性选择子，0.40g直径为1.1-1.9微米的巯丙基衍生化全多孔球形硅胶，27.0mg偶氮二异 丁腈，40ml无水氯仿，安装氮气保护装置，磁力搅拌，回流反应12小时；将反应装置冷却 至室温，加入封尾试剂0.27ml1-己烯，27.0mg偶氮二异丁腈，安装氮气保护装置，磁力 搅拌，回流反应12小时；后处理：离心洗涤产物，依次使用无水氯仿、甲醇、乙醚、正己烷 各60ml洗涤，每步离心，转速为5000rpm，时间为10min；最后的产物手性固定相在60 ℃条件下真空干燥24小时。

超高压液相色谱手性固定相(CSP)制备流程如下：

本发明的另一目的在于提供一种超高压液相色谱手性柱，利用高压匀浆法，以氯仿为匀 浆液和顶替液，在12000psi压力条件下将以上述方法制得的手性固定相填入内径2.1mm、 长度50mm的不锈钢色谱空柱管中，得到可在超高压液相色谱仪上使用的手性柱。

所述的一种超高压液相色谱手性柱，在使用前，使其在1ml/min流速条件下使用乙醇 冲柱10min，然后使用流动相在设定色谱条件下平衡10min。