[发明专利]以奎宁-叔丁基氨基甲酸酯为手性选择子制备的手性固定相及其制备方法和应用

权利要求书

1.以奎宁-叔丁基氨基甲酸酯为手性选择子制备手性固定相的方法，其特征在于，依次包括以下步骤：步骤一，制备巯丙基衍生化全多孔球形硅胶；步骤二，将奎宁-叔丁基氨基甲酸酯手性选择子键合到巯丙基衍生化全多孔球形硅胶表面上制备手性固定相。

2.根据权利要求1所述的以奎宁-叔丁基氨基甲酸酯为手性选择子制备手性固定相的方法，其特征在于，所述步骤一具体包括：精确称取5.0g的直径为1.1-1.9微米全多孔球形硅胶，加入100ml圆底烧瓶中，再加入60ml无水甲苯，安装分水器和氮气保护装置，磁力搅拌，回流共沸除水3小时；将反应装置冷却至室温，移除分水器，加入10ml衍生化试剂3-巯丙基三乙氧基硅烷，安装氮气保护装置，磁力搅拌，回流反应72小时；后处理：离心洗涤产物，依次使用无水甲苯、甲醇、乙醚、正己烷各60ml洗涤，每步离心转速为5000rpm，离心时间为10min；最后产物在60℃条件下真空干燥24小时。

3.根据权利要求1所述的以奎宁-叔丁基氨基甲酸酯为手性选择子制备手性固定相的方法，其特征在于，所述步骤二具体包括：在100ml圆底烧瓶中，加入0.27g奎宁-叔丁基氨基甲酸酯手性选择子，0.40g直径为1.1-1.9微米的巯丙基衍生化全多孔球形硅胶，27.0mg偶氮二异丁腈，40ml无水氯仿，安装氮气保护装置，磁力搅拌，回流反应12小时；将反应装置冷却至室温，加入封尾试剂0.27ml1-己烯，27.0mg偶氮二异丁腈，安装氮气保护装置，磁力搅拌，回流反应12小时；后处理：离心洗涤产物，依次使用无水氯仿、甲醇、乙醚、正己烷各60ml洗涤，每步离心，转速为5000rpm，时间为10min；最后的产物手性固定相在60℃条件下真空干燥24小时。

4.一种超高压液相色谱手性柱，其特征在于，利用高压匀浆法，以氯仿为匀浆液和顶替液，在12000psi压力条件下将以权利要求1所述方法制得的手性固定相填入内径2.1mm、长度50mm的不锈钢色谱空柱管中，得到可在超高压液相色谱仪上使用的手性柱。

5.根据权利要求4所述的一种超高压液相色谱手性柱，其特征在于，在所述手性柱使用前，使其在1ml/min流速条件下使用乙醇冲柱10min，然后使用流动相在设定色谱条件下平衡10min。

6.一种超高压液相色谱手性柱用手性固定相，其特征在于，按照权利要求1所述的方法制得。

7.以奎宁-叔丁基氨基甲酸酯为手性选择子制备的手性固定相在超高压液相色谱手性分离中的应用。

8.根据权利要求7所述的应用，其特征在于，手性分离样品为氨基上带保护基团的氨基酸，呈酸性，具体包括：N-丹磺酰基-DL-苯丙氨酸，N-苯甲酰基-DL-蛋氨酸，N-苯甲酰基-DL-亮氨酸，N-苯甲酰基-DL-苯丙氨酸，N-苯甲酰基-DL-丙氨酸，N-苯甲酰基-DL-缬氨酸，N-(3,5-二硝基苯甲酰基)-DL-亮氨酸，N-(3,5-二硝基苯甲酰基)-DL-苯丙氨酸，N-(3,5-二硝基苯甲酰)-DL-丝氨酸，N-(3,5-二硝基苯甲酰)-DL-蛋氨酸，N-(3,5-二硝基苯甲酰)-DL-丙氨酸和N-(2,4-二硝基苯基)-DL-亮氨酸。

9.根据权利要求7所述的应用，其特征在于，超高压液相色谱仪的色谱条件为：反相模式，流动相为按体积比乙腈：0.1M乙酸铵水溶液＝80:20的混合溶液，用乙酸调pH值为6.0，流速为3.0ml/min，柱温20℃，进样量为0.5微升，检测波长254nm；极性有机溶剂模式，流动相为按体积比混合的甲醇：乙酸：三乙胺＝98:2:0.2，流速为2.5ml/min，柱温20℃，进样量为0.5微升，检测波长254nm。