[发明专利]一种脱氮复合微生物菌剂的方法

权利要求书

1.一种脱氮复合微生物菌剂的方法，其特征在于具体制备步骤为：

（1）称取大豆秸秆，去除大豆秸秆上的侧枝，将去除侧枝后的大豆秸秆浸泡在无水乙醇中，浸泡30～50min后，将秸秆取出并晒干，将晒干后的秸秆与碳酸钠按质量比7:1进行混合，随后把混合物放入粉碎机中进行粉碎，过40目筛，再把过筛后所得的颗粒放入挤压机中挤压成块，将所得的块状物放入炭化炉中，在450～600℃下炭化4～6h；

（2）待上述炭化结束后，把炭化后的秸秆放入粉碎机中粉碎，过80目筛，将过筛后所得的炭化颗粒与炭化颗粒质量5～7％的钛酸丁酯混合均匀后浸泡于质量分数为6％的硝酸锂乙醇溶液，再向硝酸锂乙醇溶液中加入炭化颗粒质量2～5％的蔗糖脂肪酸酯混合均匀，随后将混合物移至25KHz超声振荡器中超声振荡30～35min，振荡结束后过滤，收集过滤物放入风干机中风干，得复合微生物菌剂载体，备用；

（3）按重量份数计，取30～35份牛肉膏、20～25份蛋白胨、8～12份3g/L氯化钠溶液、1～3份磷酸氢二钠、1～2份磷酸二氢钠及28～35份琼脂搅拌均匀后，放在紫外灯下消毒杀菌，得发酵培养基，然后将发酵培养基与大豆根瘤按质量比50:1，进行混合，得混合物；

（4）将上述得到的混合物放入发酵罐中，加入量为发酵罐容积的50％，设定温度为28～35℃，转速设定为150～180r/min，发酵7～10天后，向发酵罐中加入混合物质量0.5～0.7％的酵母粉，然后继续发酵5～8天，待发酵完成后，将发酵罐中的发酵混合物进行过滤，收集过滤液；

（5）将步骤（2）所得的复合微生物菌剂载体浸泡在过滤液中，在30～35℃下，静置浸泡4～8h后过滤，得脱氮复合微生物菌剂基体，随后将其浸泡于质量分数为0.5％的海藻酸钠水溶液中，浸泡50～60min，然后过滤收集过滤物，将所得的过滤物放入风干机中进行风干，即可得到脱氮复合微生物菌剂。