[发明专利]一种基于害虫特定气味受体筛选高效驱避剂的方法有效
申请号: | 201610078146.7 | 申请日: | 2016-02-04 |
公开(公告)号: | CN105510569B | 公开(公告)日: | 2018-06-19 |
发明(设计)人: | 王桂荣;杨婷;刘杨;张睿彬;王冰 | 申请(专利权)人: | 中国农业科学院植物保护研究所 |
主分类号: | G01N33/487 | 分类号: | G01N33/487;C12N15/85 |
代理公司: | 北京兆君联合知识产权代理事务所(普通合伙) 11333 | 代理人: | 胡敬红 |
地址: | 100193 *** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 驱避剂 气味受体 筛选 害虫 电压钳技术 双电极 生物防治害虫 异源表达系统 爪蟾卵母细胞 报警信息素 大规模筛选 行为学实验 法尼烯 再利用 激活 验证 | ||
1.一种基于害虫特定气味受体筛选高效驱避剂的方法,包括如下步骤,
①利用在所述害虫的同物种基因组中预测得到的气味受体序列,利用氨基酸一致性比对结果进行排序,选取高同源性的气味受体为候选特定气味受体,克隆得到候选特定气味受体的全长序列,
②在爪蟾卵母细胞异源表达系统中表达,
③使用双电极电压钳技术筛选对所述害虫的报警信息素或趋避性气味气体成分有反应的特定气味受体,
④使用双电极电压钳技术筛选可激活害虫特定气味受体的气味物质。
2.根据权利要求1所述的方法,所述害虫为蚜虫。
3.根据权利要求2所述的方法,所述害虫的同物种为豌豆蚜和棉蚜,所述报警信息素成分为(反)-β-法尼烯。
4.根据权利要求3所述的方法,所述步骤③中筛选得到的豌豆蚜气味受体ApisOR5和棉蚜气味受体AgosOR5。
5.根据权利要求1-4任一所述的方法,还包括步骤⑤,所述步骤⑤为通过Y型管行为学实验并计算趋避强度来检测驱避剂的趋避强度,同时筛选到最佳的可激活害虫特定气味受体的气味物质。
6.根据权利要求5所述的方法,所述害虫为蚜虫,所述气味物质为乙酸香叶酯。
7.根据权利要求1所述的方法,还包括步骤③后对筛选到的特定气味受体的验证步骤。
8.根据权利要求7所述的方法,所述验证步骤包括通过RNA干扰技术对该受体基因进行害虫体内沉默和/或利用Y型管行为学实验验证该筛选到的特定气味受体为所述害虫的报警信息素成分的特定气味受体。
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