[发明专利]一种测定奥利司他胶囊中降解杂质的方法

说明书

技术领域

本发明涉及分析化学领域，具体涉及一种常用高效液相色谱法分离测定奥利司他胶囊中降解杂质的方法。

背景技术

奥利司他于1987年首次发现，奥利司他(Orlistat)化学名为：(s)-2-甲酞氨基-4-甲基-戊酸(s)-1-[[(2s，3s)-3-己基-4-氧-2oxetany]甲基-十二烷酯，其化学式如下。商品名为赛尼可(Xenical)，是瑞士Hoffmann-LaRoche公司研发，并于1998年在新西兰首次上市，1999年在美国上市。由于奥利司他作为一种强效、长效胃肠道脂肪酶抑制剂，是一种非全身作用的、具有良好耐受性和有效性的新型减肥药物。不用食欲抑制剂而治疗肥胖，为肥胖症的药物治疗开辟了新途径。

奥利司他的降解杂质主要有以下两个来源：一是奥利司他原料及制剂在生产过程中，会产生生产工艺降解杂质；二是奥利司他胶囊在稳定性贮藏期间由于环境的影响会产生降解杂质。这些降解杂质会影响到药品的纯度和质量，需要建立降解杂质的分析方法来控制这些降解杂质的含量。各降解杂质的名称和化学结构式如下：

在已有的技术中，美国药典(USP)37版药典提供了奥利司他胶囊的杂质分析方法，但经过研究发现，使用USP37版药典中收载的分析方法检测时，开环物甲酯与奥利司他完全重叠，并且离主峰较近的工艺杂质也无法与主峰分离。另外，公开发表的文献中，参见《药学学报》，49卷第3期，380～384页(2014)和《JournalofchromatographyA》1116(2006)，153～15页。这些参考文献中发表的奥利司他胶囊杂质分析方法，均无法有效分离本发明中提到的降解杂质。

发明内容

针对上述技术问题，本发明提供一种测定奥利司他胶囊中降解杂质的方法，其特征在于：所述方法采用高效液相色谱法，将杂质混合对照品溶液及样品溶液注入高效液相色谱仪，完成奥利司他胶囊中降解杂质的测定；

所述色谱条件为：色谱柱：以硅胶实心球颗粒为填料的色谱柱；流动相：流动相A为酸性水溶液，流动相B为有机溶剂，流动相A的体积百分比与流动相B的体积百分比的和始终保持为100％，进行线性梯度洗脱。所述色谱柱优选waters公司CortecsC18柱。

进一步地，所述线性梯度如下：流动相B的起始比例为体积比81～83％、保持16min，19min时升至体积比91％、保持3min，23min时升至体积比95％、保持6min，30min时降至体积比81～83％、保持7min。

具体地，所述流动相A的溶质为磷酸或高氯酸，体积百分比为0.005～0.025％；所述流动相B选自甲醇、乙腈、乙醇、四氢呋喃中的一种或者两种以上混合物。所述流动相A的溶质溶质优选为磷酸，体积百分比为选0.01％～0.1％，最优选0.025％。所述流动相B优选为甲醇或乙腈，更优选为乙腈。

具体地，所述流动相的流速为0.5mL/min～2.0mL/min。优选为1.3mL/min。

具体地，所述色谱柱温度为25℃～40℃。优选为35℃。

具体地，所述方法还包括检测波长，所述检测波长为190nm～205nm。优选为195nm。

具体地，所述方法还包括进样量，所述进样量为10μL～50μL。

具体地，所述样品溶液制备方法如下：取奥利司他胶囊样品适量，用体积百分比为80％的乙腈溶液溶解并稀释，配制成每1mL含奥利司他0.5～1.5mg的样品溶液。

具体地，所述杂质混合对照品溶液制备方法如下：取奥利司他原料，加入乙腈-水体积比为4∶1的混合溶液制成每1mL含0.5mg的奥利司他原料储备液，分别取杂质开环物异构体、开环物、杂质D、己基十一烷酮和二十一烷基亮氨酸杂质对照品适量，取破坏溶液适量，加乙腈-水体积比为4∶1的混合溶液稀释，制成每1mL含0.5mg的杂质对照品贮备液，量取上述杂质对照品贮备液1mL，置50mL量瓶中，用奥利司他原料储备液稀释至刻度，即得；所述破坏溶液通过酸、碱、氧、高温和光照破坏奥利司他胶囊样品，对破坏后的样品加甲醇-水体积比为4∶1的混合溶剂超声溶解并稀释制得。

本发明所述的分离测定方法，可按照以下方法实现：