[发明专利]HIV-1广谱中和抗体及其用途

说明书

本发明涉及HIV‑1广谱中和抗体，所述抗体特异性结合HIV‑1gp120。本发明还涉及所述抗体的制备方法和用途。

技术领域

本发明涉及HIV-1广谱中和抗体，所述抗体特异性结合HIV-1gp120。本发明还涉及所述抗体的制备方法和用途。

背景技术

HIV-1中和抗体能够有效阻止HIV-1进入人的CD4+T细胞。因此，作为对HIV-1感染者的一种治疗手段，艾滋病研究领域一直在致力于开发强效的HIV-1广谱中和抗体。

最早通过噬菌体展示文库技术得到了单克隆抗体b12，但是仅能中约40％的已知HIV-1病毒^[1]。从2010年开始，得益于单个B细胞分选和深度测序等技术的发展进步，已经从HIV-1感染者中分离出一些针对HIV-1病毒刺突上不同表位的具有广谱中和活性的单克隆抗体，如针对gp120的CD4结合位点的VRC01^[2]，针对gp120的V1V2含聚糖区域的PG9和PG16^[3]，针对gp120的以N332聚糖为中心的V3区域的PGT121^[4]，针对近膜区(MPER，membraneproximal external region)的10E8抗体^[5]和针对gp120-gp41交界处的35O22^[6]等。

鉴于HIV-1存在多种进化枝且在世界范围内不同地区存在不同的主要流行株，组合应用两种或更多种广谱中和抗体显然是一种更具潜力的治疗策略。因此，艾滋病研究领域仍需要开发出新的强效广谱反应性HIV-1中和抗体。

发明内容

本发明提供特异性结合HIV-1gp120的人单克隆抗体及其功能性片段，所述抗体能够阻断HIV-1进入靶细胞。本发明还提供编码上述抗体或抗体片段的核酸分子以及包含至少一种上述核酸分子的表达载体。本 发明还提供经至少一种上述核酸分子或表达载体转化的宿主细胞。本发明还提供使用至少一种上述核酸分子或表达载体或宿主细胞来生产抗体的方法。本发明还提供包含至少一种上述抗体或抗体片段的药物组合物。在一些实施方式中，本发明的抗体的重链可变区包含(i)分别相应于SEQ ID NO:2的氨基酸31-35、50-66和99-109的VHCDR1、VHCDR2和VHCDR3，或(ii)分别相应于SEQ ID NO:4的氨基酸31-35、50-66和99-109的VHCDR1、VHCDR2和VHCDR3，或(iii)分别相应于SEQ ID NO:6的氨基酸31-35、50-66和99-109的VHCDR1、VHCDR2和VHCDR3，且本发明的抗体的轻链可变区包含分别相应于SEQ ID NO:10的氨基酸24-32、48-54和87-91的VLCDR1、VLCDR2和VLCDR3。本发明的抗体是特异性结合HIV-1gp120的广谱中和抗体。

本发明还提供检测人类对象的HIV-1感染的方法，包括使来自所述对象的生物学样品与本发明的抗体或抗体片段相接触，并确定所述样品中是否存在由所述抗体或所述抗体片段形成的免疫复合物，其中存在所述免疫复合物表明所述对象有HIV-1感染。在一些实施方式中，在进行所述接触之前将所述样品固定化于固相基材。在另一些实施方式中，在进行所述接触之前将所述抗体或抗体片段固定化于固相基材。在一些实施方式中，所述抗体或抗体片段标记了荧光标记、酶标记或放射性标记。在一些实施方式中，使用特异性结合所述抗体或抗体片段的第二抗体检测免疫复合物。在另一些实施方式中，使用特异性结合HIV-1的抗原的第二抗体检测免疫复合物。本发明还提供用于检测人类对象的HIV-1感染的试剂盒，其包含本发明的抗体或抗体片段。

本发明进一步提供预防或治疗人类对象的HIV-1感染的方法，包括给所述对象施用有效量的至少一种本发明的抗体或抗体片段或本发明的药物组合物。在一些实施方式中，所述对象患有获得性免疫缺陷综合征(AIDS)。在一些实施方式中，还包括给所述对象施用至少一种抗HIV-1的抗病毒药物。