[发明专利]一种核酸提取方法及其专用试剂盒有效
| 申请号： | 201610069995.6 | 申请日： | 2016-02-01 |
| 公开（公告）号： | CN105567676B | 公开（公告）日： | 2018-06-26 |
| 发明（设计）人： | 王磊;陈翔;邢婉丽;程京;周峣;林明仙;张闻天;王东 | 申请（专利权）人： | 博奥生物集团有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/10 | 分类号： | C12N15/10 |
| 代理公司： | 北京纪凯知识产权代理有限公司 11245 | 代理人： | 关畅;何叶喧 |
| 地址： | 102206 北京市昌平区*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 二硫苏糖醇 核酸提取物 专用试剂盒 核酸提取 硫酸氢钠 氢氧化钠 组分混合 甘露醇 海藻糖 微流控芯片 反应条件 扩增反应 试剂保存 试剂盒 核酸 取样 应用 | ||
1.一种提取微生物和/或动物核酸的方法，包括如下步骤：
(1)取样本液，与A组分混合并反应，形成反应体系；所述A组分由氢氧化钠和二硫苏糖醇组成；
(2)完成步骤(1)后，取反应体系，与B组分混合，得到核酸提取物；所述B组分为硫酸氢钠；
所述步骤(1)的所述反应体系中，氢氧化钠的浓度为0.01mol/L-0.05mol/L，二硫苏糖醇的浓度为0.001mol/L-0.01mol/L；
所述步骤(1)中，所述反应的温度为50℃-75℃；
所述步骤(2)的所述混合后，硫酸氢钠的浓度为0.0044mol/L-0.32mol/L。
2.一种提取微生物和/或动物核酸的方法，包括如下步骤：
(1)取样本液，与A组分混合并反应，形成反应体系；所述A组分为含有氢氧化钠和二硫苏糖醇的水溶液；
(2)完成步骤(1)后，取反应体系，与B组分混合，得到核酸提取物；所述B组分为硫酸氢钠水溶液；
所述步骤(1)的所述反应体系中，氢氧化钠的浓度为0.01mol/L-0.05mol/L，二硫苏糖醇的浓度为0.001mol/L-0.01mol/L；
所述步骤(1)中，所述反应的温度为50℃-75℃；
所述步骤(2)的所述混合后，硫酸氢钠的浓度为0.0044mol/L-0.32mol/L。
3.如权利要求2所述的方法，其特征在于：
所述步骤(1)中，1体积份A组分与9体积份样本液混合；
所述步骤(2)中，3体积份反应体系与2体积份B组分混合。
4.一种提取微生物和/或动物核酸的方法，包括如下步骤：
(1)取样本液，与A组分混合并反应，形成反应体系；所述A组分由氢氧化钠和二硫苏糖醇组成；
(2)完成步骤(1)后，取反应体系，与B组分混合，得到核酸提取物；所述B组分由海藻糖和甘露醇组成；
所述步骤(1)的所述反应体系中，氢氧化钠的浓度为0.01mol/L-0.05mol/L，二硫苏糖醇的浓度为0.001mol/L-0.01mol/L；
所述步骤(1)中，所述反应的温度为50℃-75℃；
所述步骤(2)的所述混合后，海藻糖的浓度为13.5g/L-80g/L，甘露醇的浓度为10.5g/L-80g/L。
5.一种提取微生物和/或动物核酸的方法，包括如下步骤：
(1)取样本液，与A组分混合并反应，形成反应体系；所述A组分为含有氢氧化钠和二硫苏糖醇的水溶液；
(2)完成步骤(1)后，取反应体系，与B组分混合，得到核酸提取物；所述B组分为含有海藻糖和甘露醇的水溶液；
所述步骤(1)的所述反应体系中，氢氧化钠的浓度为0.01mol/L-0.05mol/L，二硫苏糖醇的浓度为0.001mol/L-0.01mol/L；
所述步骤(1)中，所述反应的温度为50℃-75℃；
所述步骤(2)的所述混合后，海藻糖的浓度为13.5g/L-80g/L，甘露醇的浓度为10.5g/L-80g/L。
6.如权利要求5所述的方法，其特征在于：
所述步骤(1)中，1体积份A组分与9体积份样本液混合；
所述步骤(2)中，3体积份反应体系与2体积份B组分混合。
7.一种用于生物核酸提取的试剂盒，包括A组分和B组分；
所述A组分为含有0.1mol/L-0.5mol/L氢氧化钠和0.01mol/L-0.1mol/L二硫苏糖醇的水溶液；
所述B组分为0.08mol/L-0.8mol/L硫酸氢钠水溶液；
所述生物为微生物或动物。
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